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恒遠(yuǎn)為您總結(jié)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)失敗的原因
閱讀：1405 發(fā)布時(shí)間：2021-2-19成功的實(shí)驗(yàn)是一個(gè)循序漸進(jìn)的過程,，影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素有很多,，只有一一的掌握了實(shí)驗(yàn)的細(xì)節(jié),，才能購做出完美的實(shí)驗(yàn),。您可知您的ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)為什么會(huì)失敗,？今天文章的內(nèi)容中,，小編將為您找找其中的原因。
第yi,、標(biāo)本的影響
溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測(cè)易產(chǎn)生假陽性,。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(zhì)（紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素）,，在洗滌過程中往往難以*洗脫,，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧（O），從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺可溶性的有色物質(zhì),，即顯藍(lán)色,，產(chǎn)生假陽性。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用,。
第二,、標(biāo)本受細(xì)菌污染
因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此,，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。
第三,、標(biāo)本保存不當(dāng)
在冰箱中保存過久的標(biāo)本,，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過深、造成假陽性,；為克服上述干擾,，ELISA試劑盒測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集；如不能立即測(cè)定,，5d內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4
℃,，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本,，蛋白質(zhì)局部濃縮,，分布不均，應(yīng)充分混合后再測(cè)定，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,，不可強(qiáng)烈振蕩,。
第四、標(biāo)本凝固不全
在工作中,，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),，常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,，在ELISA測(cè)定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,，易造成假陽性結(jié)果；因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,。
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