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恒遠(yuǎn)為您總結(jié)ELISA實驗失敗的原因
閱讀：1389 發(fā)布時間：2021-2-3ELISA試劑盒實驗也同樣如此,，成功的實驗是一個循序漸進(jìn)的過程,，影響ELISA實驗結(jié)果的因素有很多,，只有一一的掌握了實驗的細(xì)節(jié),，才能購做出完美的實驗,。您可知您的ELISA試劑盒實驗為什么會失敗？今天文章的內(nèi)容中,，小編將為您找找其中的原因,。
第yi、標(biāo)本的影響
溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性,?？赡苁侨苎逯泻羞^氧化酶物質(zhì)（紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），在洗滌過程中往往難以*洗脫,，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧（O）,，從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍(lán)色,，產(chǎn)生假陽性,。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。
第二,、標(biāo)本受細(xì)菌污染
因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果,。
第三、標(biāo)本保存不當(dāng)
在冰箱中保存過久的標(biāo)本,，在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深,、造成假陽性；為克服上述干擾,，ELISA試劑盒測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集,；如不能立即測定，5d內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4
℃,，1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存,；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)局部濃縮,，分布不均,，應(yīng)充分混合后再測定，但混勻時應(yīng)輕柔,，不可強(qiáng)烈振蕩,。
第四、標(biāo)本凝固不全
在工作中,，有時為了爭取時間快速檢測,，常在血液還未開始凝固時即強(qiáng)行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,，在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,，易造成假陽性結(jié)果,；因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。