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技術(shù)快訊:SH30396.03胎牛血清使用中的常見問題解答
閱讀:989 發(fā)布時間:2021-1-15SH30396.03胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能,。今天恒遠生物小編給大家講講SH30396.03胎牛血清在使用中常見的問題解析,。
一、保存血清好的辦法,?
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,。若你一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),,再放回冷凍,。
二、如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損,?
我們建議您將血清從冷凍箱中取出后,,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻,。
三、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理,?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的,;而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,,也會存在于血清中,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無菌離心管中,,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
四,、何謂熱滅活,?有必要做熱滅活嗎?
一般以56℃,,30分鐘來處理已解凍的血清,,因為此加熱步驟,可以使補體去活性,,而補體所參與的反應(yīng)有:溶細胞活性,,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,,增強吞噬作用,,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活,。
實驗顯示,,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的,。經(jīng)過處理的血清對細胞生長只有微小的促進,,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,,而造成細胞生長速率的降低,。
而經(jīng)過熱處理的血清,,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,,像是“小黑點”,,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,,又會使此沉淀物更增多,,使研究者認為是微生物的分裂擴增。
因此我們建議您,,若非必須,,您可以不需要做熱滅活這一步。如此以來,,不但節(jié)省您寶貴的時間,,更確保您血清的質(zhì)量!
五,、如何避免沉淀物的出現(xiàn),?
我們建議您在使用血清的時候,注意正確的血清解凍步驟,,并盡量避免滅活血清及長時間的將血清置于高溫環(huán)境中,。
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