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1.切片，烤片60℃,，1h,；

2.脫蠟及復(fù)水：二甲苯10min，100％乙醇5min,，95％乙醇5min,，90％乙醇5min，85％乙醇5min，80％乙醇5min,， 75％乙醇5min,，60％乙醇5min，50％乙醇5min,，30％乙醇5min,，自來水1min，雙氧水1min,；

3.1份30％H2O2加10份蒸餾水,，室溫10min，蒸餾水洗3次,，每次3min,；

4.微波修復(fù)：將切片浸入0.01M枸櫞酸緩沖液，微波中大火力（98℃-100℃）加熱至沸騰,，冷卻（約5-10min）,，反復(fù)兩次；

5.將切片自然冷卻至室溫,，PBS洗滌3次,，每次5min；

6.封閉,，5％BSA,，室溫20min，甩去多余液體,；

7.滴加一抗,，37℃，1h,，或者4℃過夜,；

8.PBS洗滌3次，每次3min,；

9.滴加二抗,，37℃，15-30min,；

10.PBS洗滌3次,，每次3min；

11.滴加SABC,，37℃,， 30min,；

12.PBS洗滌3次,，每次5min；

13.1ml蒸餾水中分別滴加顯色劑，混勻,；

14.DAB顯色劑配置好后,，滴加于切片，室溫,，鏡下檢測反應(yīng)時(shí)間（約5min）,；

15.自來水沖洗干凈，過蒸餾水,；

16.蘇木素復(fù)染2min,，自來水沖洗；

17.脫水：30％乙醇3min,，50％乙醇3min,，70％乙醇3min，80％乙醇3min,，90％乙醇3min,，95％乙醇3min，100％乙醇3min,，二甲苯20min,；

18.樹膠封片，鏡檢,。

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