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代測ELISA常見問題
閱讀：1716 發(fā)布時(shí)間：2019-7-30購買我司ELISA試劑盒產(chǎn)品系類,，下單贈送免費(fèi)代測服務(wù),，如果您沒有時(shí)間,，可*交由我們?yōu)槟赓M(fèi)代測哦,。您只需將收集好的樣本郵寄我司即可，上海地區(qū)的客戶我司還可安排上門取件哦,，我們致力于提供生命科學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)服務(wù),，提供實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)，為廣大科研工作者大大節(jié)省了重復(fù)勞動(dòng)的時(shí)間和精力,，我們有過硬的技術(shù)咨詢和完善的售后服務(wù),，為您解決后顧之憂。代測ELISA也會遇到以下常見問題：
1. 產(chǎn)品有哪幾種規(guī)格,？可檢測多少個(gè)樣本,？
產(chǎn)品分為48T和96T兩種規(guī)格。
每次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線一般設(shè)7個(gè)不同濃度,，加上空白孔,，標(biāo)準(zhǔn)曲線一共需要8個(gè)孔,。因此，一個(gè)48T試劑盒多可以測定40個(gè)樣本（不做重復(fù)且一次用完）,，一個(gè)96T試劑盒多可以測定88個(gè)樣本（不做重復(fù)且一次用完）,。可以根據(jù)實(shí)際樣本數(shù)量和實(shí)驗(yàn)計(jì)劃選擇合適的產(chǎn)品規(guī)格,。
2.48T和96T的試劑盒有哪些不同,？
48T和96T的試劑盒，每個(gè)孔的反應(yīng)體系都是*一樣的,。不同的是試劑盒中各組分的規(guī)格,，詳見說明書。
3. 產(chǎn)品的穩(wěn)定性如何,？
產(chǎn)品在研發(fā)前期已通過嚴(yán)格的穩(wěn)定測試,，發(fā)貨前亦須通過檢測并提供質(zhì)檢報(bào)告，在市場上深受廣大客戶的贊許,！
4.貴公司有沒有酶活性檢測的試劑盒,？
酶活力的測定實(shí)際上就是測定酶促反應(yīng)的速率。酶活力的大小即酶含量的多少,，可以用每克酶制劑或每毫升酶制劑含有多少酶單位來表示,，單位是U/g或U/ml。酶活力的測定方法：⑴測定完成一定量反應(yīng)所需的時(shí)間,，⑵測定單位時(shí)間內(nèi)酶催化化學(xué)反應(yīng)量,。主要通過產(chǎn)物的增加量或底物的減少量來測定。常用的方法有：⑴分光光度法,，⑵熒光法,，⑶同位素測定法，⑷電化學(xué)法,。
ELISA的方法一般是對可溶性抗原或抗體進(jìn)行定性和定量的檢測,，所以酶活性是不能用ELISA來檢測的,。
5.一次ELISA實(shí)驗(yàn)需要多長時(shí)間,？
雙抗體夾心ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要4-4.5小時(shí)，競爭ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要2-2.5小時(shí),。
6.血清樣本如何處理,？
全血標(biāo)本于室溫放置2小時(shí)或4℃guo夜后于1000×g離心20分鐘。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
7. 血漿樣本如何處理,？
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后，于1000×g離心15分鐘,，仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
8. 尿液樣本如何處理,？
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照此實(shí)行。
9.細(xì)胞上清液樣本如何處理,？
檢測分泌性的成份時(shí),，用無菌管收集。離心20分鐘左右（1000×g）,。仔細(xì)收集上清,。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心10分鐘左右（5000×g）,。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
10. 組織樣本如何處理？
用預(yù)冷的PBS （0.01M,pH=7.4）沖洗組織,，以去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果）,，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣本對應(yīng)9mL的PBS,，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中,，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,，或反復(fù)凍融,。后將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘，取上清檢測,。
11.為什么有的試劑盒是采用競爭ELISA法,？
小分子抗原或半抗原因?yàn)槿狈勺鲓A心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn)，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定,，可以采用競爭法,。其原理是標(biāo)本中的抗原和固相載體上的抗原競爭生物素化抗體上的結(jié)合位點(diǎn)，標(biāo)本中抗原量含量愈多,，結(jié)合在固相上的生物素化抗體愈少,，后的顯色也愈淺，即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比,。小分子激素,、藥物等ELISA測定多用此法。
12.用什么軟件處理ELISA檢測的數(shù)據(jù)比較好,？
ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合可以應(yīng)用Curve Expert軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,。它使用非常方便，可以漂亮的曲線應(yīng)用到論文之中,。軟件可以在下載中心進(jìn)行下載,。
13. 試劑盒做的結(jié)果不理想怎么辦？
實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想請及時(shí)與客服或技術(shù)支持聯(lián)系,，我們可以幫您一起分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。如果僅憑實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)無法判斷，您可以將試劑盒發(fā)回給我們進(jìn)行售后檢測,。如果是試劑盒本身的質(zhì)量問題,，可以為您退換貨；如果是實(shí)驗(yàn)操作的問題,，技術(shù)人員可以給您一些改進(jìn)的建議,。
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