化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
ELISA試劑盒檢測結(jié)果的三大條件
閱讀：1340 發(fā)布時間：2019-5-22 ELISA試劑盒質(zhì)量保證是一個復(fù)雜的過程,，許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測的質(zhì)量,。在實驗室,，對試劑準(zhǔn)備一般不太注意,，通常的做法是,，在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用，而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,，其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性,。
ELISA試劑盒檢測結(jié)果也是有三大條件的，下面就讓我們來具體看看是哪些吧,！
一,、ELISA加樣步驟
在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本,，加酶結(jié)合物,，加底物。凍結(jié)血清融解后,，蛋白質(zhì)局部濃縮,，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩,，避免氣泡,，可上下倒置混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩,。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,，而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、血kuai收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,，再在其加入血清標(biāo)本,，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。一般說來,，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,，超過一周測定的需低溫冰存?？捎米鱁LISA測定的標(biāo)本十分廣泛,，體液、分泌物和排泄物等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體 或抗原成份,，ELISA試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保留,。
二、固相載體
ELISA的操縱因固相載體的形成不同而有所差異,，海內(nèi)醫(yī)學(xué)檢修一般均用板式點,。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢修中均以血清作為檢測標(biāo)本,。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物用液時可用定量多道加液器,，使加液過程迅速完成。如有細(xì)菌污染,，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,，以發(fā)生交叉污染,，也可用一次性的定量塑料管加樣。的試劑,，良好的儀器和準(zhǔn)確的操縱是保證ELISA試劑盒檢測結(jié)果正確可靠的必要條件,。ELISA頂用的蒸餾 水或去離子水，包括用于洗滌的,，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的,。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定，有些則需經(jīng)預(yù)處理,。
三,、標(biāo)本因素
血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)留意避免溶血,，紅細(xì)胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),，以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色,。如在冰箱中保留過久,，其中的可發(fā)生聚合,，在間接法ELISA中可使本底加深。本文將敘述板式ELISA各個操縱步驟的留意要點,，珠式,、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,，嚴(yán)格遵照劃定操縱,，必能得出正確的結(jié)果。加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,，避免加在孔壁上部,，并留意不可濺出，不可產(chǎn)氣憤泡,。有此測定需用稀的血清,，可在試管中按劃定的稀釋度稀釋后再加樣。
以上就是今天的文章內(nèi)容了,，了解更多相關(guān)ELISA檢測要點,，歡迎您關(guān)注本公司wang站， 有任何問題都可以在本wang站中留言咨詢,，上海恒遠(yuǎn)感謝您的支持,！