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單克隆抗體技術(shù)原理
閱讀：1693 發(fā)布時間：2019-4-16導(dǎo)讀：單克隆抗體是指一個B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞所形成的,，產(chǎn)生只針對一個抗原決定簇的純抗體,。
B淋巴細(xì)胞在抗原的刺激下,，能夠分化、增殖形成具有針對這種抗原分泌特異性抗體的能力,。B細(xì)胞的這種能力和量是有限的，不可能持續(xù)分化增殖下去,，因此產(chǎn)生免疫球蛋白的能力也是極其微小的,。將這種B細(xì)胞與非分泌型的骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，再進(jìn)一步克隆化,，這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞是既具有瘤的無限生長的能力,，又具有產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞的能力,，將這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)或注入小鼠體內(nèi)即可獲得大量的價、單一的特異性抗體,。這種技術(shù)即稱為單克隆抗體技術(shù),。
制備單克隆抗體的方法是用缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶或胸腺嘧啶核苷酸酶的瘤細(xì)胞變異株與脾臟的B細(xì)胞融合,。采用HAT選擇性培養(yǎng)基（培養(yǎng)基中加次黃嘌呤HyPoxanthineH，氨基喋呤AminoopterinA及胸腺嘧啶核苷ThymidineT）,，在這種選擇性培養(yǎng)基中,，由于變異的瘤細(xì)胞不具有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶或胸腺嘧啶核苷激酶，所以不能利用培養(yǎng)基中的次黃嘌呤或胸腺嘧啶核苷而合成DNA,。而只能利用谷酰胺與尿核苷酸單磷酸合成DNA,，這一途徑又被氨基喋呤所阻斷，所以未融合的瘤細(xì)胞不可避免也要死亡,。融合的雜交瘤細(xì)胞由于脾淋巴細(xì)胞具有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶,，可以通過次黃嘌呤合成DNA，克服氨基喋呤的阻斷,，因此雜交瘤細(xì)胞大量繁殖而被篩選出來,。B淋巴細(xì)胞在一般培養(yǎng)基中不能長期生長，一般于二周內(nèi)均死亡,。
單克隆抗體與常規(guī)抗體相比有如下優(yōu)點：①單一特異性,，與一個抗原決定簇反應(yīng)；②可重復(fù)性,，能夠提供*一樣的抗體制劑,；③一經(jīng)制出，可無*地供應(yīng),；④生產(chǎn)單克隆抗體,，不一定需要純的抗原；⑤能查出混合物中存在的用常規(guī)方法查不出的少量成分,。
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