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基因組DNA提取方法

  制備基因組DNA是進行基因結(jié)構和功能研究的重要步驟，通常要求得到的片段的長度不小于100-200kb。在DNA提取過程中應盡量避免使DNA斷裂和降解的各種因素,，以保證DNA的完整性,，為后續(xù)的實驗打下基礎。主要是CTAB方法,，其他的方法還有1物理方式:玻璃珠法,超聲波法,研磨法,凍融法,。2化學方式：異硫氰酸胍法,堿裂解法3生物方式:酶法。根據(jù)核酸分離純化方式的不同有:硅質(zhì)材料,、陰離子交換樹脂等

試驗步驟：

1,、貼壁細胞用胰酶消化，離心收集,。

2,、細胞重懸于冰冷的PBS漂洗一次,，離心收集,。試驗步驟2再重新作一邊。

3,、加入5mlDNA提取緩沖液,，（10mmol/LTris-cl,0.1mol/LEDTA,o.5%SDS）,混勻。

4,、加入25ul蛋白酶K,使終濃度達到100ug/ml,混勻,，50℃水浴3h,

5、用等體積的酚抽提一次,，2500rpm離心收集水相,，用等體積的（酚，氯仿,，異戊醇）混合物抽提一次,，2500r/min離心收集水相

6、用等體積的氯仿,，異戊醇抽提一次,。加入等體積的5mol/L的LiCL,混勻，冰浴,，10min.,。

7、2500rpm離心10min.轉(zhuǎn)上清于一離心管中,。加入等體積的異丙醇,。室溫10min。

2500rpm,離心10min,。棄上清,。

8、加入0.1倍體積3mol/L乙酸鈉（PH5.2）與2倍體積-20℃預冷無水乙醇。-20℃20min,。

9,、12000r/min,室溫離心5min。棄上清,。將DNA溶于適量TE中,。
公司主要代理產(chǎn)品：
試劑盒：ELISA試劑盒、檢測試劑盒,、免疫組化試劑盒,、放免試劑盒、分子生物學試劑盒,、金標檢測試劑盒,、Omega試劑盒、細胞凋亡試劑盒,、生化試劑盒,。
各種動物血清：內(nèi)皮細胞血清、Hyclone,、GIBCO胎牛血清,。
抗體：進口原裝抗體、進口分裝抗體,、單克隆抗體,、多克隆抗體、單標抗體,、雙標抗體,、多標抗體、一抗,、二抗,；免疫組化抗體、免疫熒光抗體,、流式細胞抗體,、免疫細胞化學抗體。
細胞：*細胞,、腫瘤細胞,、正常細胞、腫瘤耐藥細胞,。
耗材：細胞培養(yǎng)耗材,、普通實驗耗材。
生化試劑：*生化試劑,、進口分裝生化試劑,。