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1. 操作前應(yīng)對實驗的物理參數(shù)有充分的了解,，如環(huán)境溫度(保持在18 C～25℃),、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等,，要先查看水育箱溫度,，ELISA試劑盒是否符合求。
2. 正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,，避免刮擦包被板底部。ELISA試劑盒加樣過程中避免液體外濺,，血清殘留在反應(yīng)孔壁上,，加樣器吸頭要清洗干凈，避免污染,，加樣次序要與說明書一致,，否則可導(dǎo)致結(jié)果錯誤，實驗重復(fù)性差,。
3. 手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,，洗滌次數(shù)不要超過說明書推薦的洗滌次數(shù)，洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)滯留的時間不宜太長,。不要使洗液在孑L間竄流,，造成孔問污染，導(dǎo)致假陰性或假陽性,。
4. 要保證加液量一致 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,，滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn)，造成顯色不統(tǒng)一,，判斷錯誤,。
5. 顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下，加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),，顯色液量不能過多,，以免顯色過強(qiáng)。ELISA試劑盒的影響因素應(yīng)選用有國家批準(zhǔn)文號,，質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,，不能圖便宜，忽視質(zhì)量保證,。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi),，在使用時先平衡至室溫，不同批號的試劑組分不宜交叉使用,。試劑開啟后要在一周內(nèi)用完,，剩余的試劑下次用時應(yīng)先檢查是否變質(zhì),，顯色劑如被污染變色將造成全部顯色，導(dǎo)致錯誤結(jié)果,。