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ELISA試劑盒測定中試劑的準備Z為關鍵,啦啦啦,！
閱讀：1772 發(fā)布時間：2017-4-26在實驗室，對試劑準備一般不太注意,，通常的做法是,，在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用，而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,，ELISA試劑盒其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出現(xiàn)假陰性,。因此在實驗開始前，將試劑盒先從冰箱中拿出來,，在室溫下放置20分鐘以上后,，再進行測定，以使試劑盒在使用前與室溫平衡,。這樣做的目的,，主要是為了在后面的溫育反應步驟中，能使反應微孔內(nèi)的溫度能較快地達到所要求的高度,，以滿足測定要求,。其次，上海恒遠生化試劑有限公司還指出以下幾點：
ELISA試劑盒的操作步驟
1,、取出試劑盒,，室溫（20-25℃）放置30分鐘。
2,、分組：取出96孔板,，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設標準品組（6個濃度）,、空白孔、待測樣品組,。
3,、標準品的稀釋：準備小試管6 只，依次編好號碼,，先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul,，然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中，充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,，充分混勻,；再在該試管中取100ul加入第三只試管中，充分混勻,；再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,，充分混勻,；再在該試管中取100ul加入第五只試管中，充分混勻,；然后在該試管中取100ul,，棄掉。第六只試管作為0 號標準品,。
注：為減少實驗誤差,，保證準確性，建議設置復孔,。
4、加樣：依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中,；空白對照孔加入50ul的蒸餾水,；其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。
5,、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘,。
6、洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30 秒棄去,，如此重復5 次，拍干,。
7,、加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液（空白對照孔除外）,。
8,、溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時,。
9,、洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15-30s,，充分清洗酶標板5次,，用吸水紙*拍干。
10,、顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后,，再加入顯色劑B液50ul,。
11、終止：25-37℃下避光反應10-15分鐘,，加入50ul終止液,。
12、讀板：在450nm波長讀取各孔的OD值,。
目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,， ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的,，應為新鮮的和高質(zhì)量的,。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用,。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存.
本公司提供的elisa試劑盒具有靈敏度高,、質(zhì)量可靠、操作簡單等特點,。歡迎新老客戶,。