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您應(yīng)該不知道ELISA試劑盒的限貨使用吧
閱讀：1745 發(fā)布時(shí)間：2017-3-23 廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中的ELISA試劑盒，有著靈敏度高,、特異性強(qiáng),、經(jīng)濟(jì)性較好等優(yōu)點(diǎn)，于我公司購(gòu)買還可以享受7.8折優(yōu)惠,。上海恒遠(yuǎn)現(xiàn)在就告訴您ELISA試劑盒現(xiàn)貨的使用吧,。
ELISA試劑盒的種屬分類是怎樣的？常見(jiàn)檢測(cè)種屬有人,、大鼠,、小鼠、豬等,。在測(cè)定時(shí),，受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)，用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi),。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。
·實(shí)驗(yàn)操作程序簡(jiǎn)述
1. 準(zhǔn)備試劑,，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,；
2. 加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，37℃反應(yīng)30分鐘,；
3. 洗板5次,，加入酶標(biāo)試劑，37℃反應(yīng)30分鐘,；
4. 洗板5次,，加入顯色液A、B,，37℃反應(yīng)10分鐘；
5. 加入終止液,；
6. 15分鐘之內(nèi)度OD值,；
7. 計(jì)算。
·競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原
小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定,，可以采用競(jìng)爭(zhēng)法模式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合,。標(biāo)本中抗原量含量愈多,，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少，zui后的顯色也愈淺,。小分子激素,、藥物等ELISA測(cè)定多用此法。
·包被的條件
包被用抗原或抗體的濃度,，包被的溫度和時(shí)間,，包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)的特點(diǎn)和材料的性質(zhì)而選定。抗體和蛋白質(zhì)抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液，也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的,。通常在ELISA板孔中加入包被液后,，在4-8℃冰箱中放置放置一個(gè)晚上，37℃中保溫2小時(shí)被認(rèn)為具有同等的包被效果,。包被的zui適當(dāng)濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化，每批材料需通過(guò)實(shí)驗(yàn)與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定。一般蛋白質(zhì)的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml,。
·抗原和抗體
制備結(jié)合物時(shí)所用抗體一般 均為純度較高的IgG，以免在與酶聯(lián)結(jié)時(shí)其他雜蛋白的干擾,。用親和層析純的抗體,，這樣全部酶結(jié)合物均具有特異的免疫活性，可以在高稀釋度進(jìn)行反應(yīng),，實(shí)驗(yàn)結(jié)果本底淺淡,。如用F(ab')2進(jìn)行標(biāo)記,，則更可避免標(biāo)本中RF的干擾。在ELISA試劑盒現(xiàn)貨中用酶標(biāo)抗原的模式不多,，總的要求是抗原必須是高純度的,。
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