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ELISA檢測試劑盒的抗體免疫學(xué)反應(yīng)檢測
閱讀：2184 發(fā)布時間：2016-12-20現(xiàn)在已有多種自動化儀器用于微量反應(yīng)板型的ELISA檢測試劑盒,，包括加樣,、洗滌,、保溫、比色等步驟,，對操作的標(biāo)準(zhǔn)化極為有利,。良好的elisa試劑盒板應(yīng)該是吸附性能好,，空白值低，孔底透明度高,，各板之間和同一板各孔之間性能相近,。聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工藝的差別，各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大,。因此每一批號的聚苯乙烯制品在使用前須檢查其性能,。常用的檢查方法為：以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔后，每孔內(nèi)加入適當(dāng)稀釋的酶標(biāo)抗人IgG抗體,，保溫后洗滌,，加底物顯色，終止酶反應(yīng)后分別測每孔溶液的吸光度,?？刂品磻?yīng)條件，使各讀數(shù)在0.8左右,。計算所有讀數(shù)的平均值,。
所有單個讀數(shù)與平均讀數(shù)之差應(yīng)小于10%.與聚苯乙烯類似的塑料為聚氯乙烯。作為ELISA固相載體,，聚氯乙烯板的特點為質(zhì)軟板薄,，可切割，價廉,、但光潔度不如聚苯乙烯板,。聚氯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值有時也略高,。免疫熒光技術(shù)雖已廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)的研究與診斷,，但是熒光抗體染色標(biāo)本不能長期保存，對組織細胞的細微結(jié)構(gòu)分辨不清,，免疫酶技術(shù)則能克服上述不足,，標(biāo)記免疫酶技術(shù)的敏感性更優(yōu)于免疫熒光法，ELISA檢測試劑盒對石蠟切片標(biāo)本尤為適用,，為免疫病理研究開辟了一條新途徑,，酶顯色產(chǎn)物具有較高的電子密度，經(jīng)過適當(dāng)處理還可以進行免疫電鏡觀察,，免疫酶組化技術(shù)分為酶標(biāo)記法與非標(biāo)記抗體技術(shù),，前者是將酶通過交聯(lián)劑結(jié)合在抗體分子上，形成酶標(biāo)記抗體,。后者是將酶作為抗原與相應(yīng)的特異性抗體連接進行的免疫反應(yīng),，稱為非標(biāo)記抗體酶技術(shù)。
免疫酶技術(shù)利用酶催化底物反應(yīng)的生物放大作用,，提高特異性抗原-敏感性的一種標(biāo)記免疫技術(shù),。該技術(shù)所用的酶要求純度高,、催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高、專一性強,、性質(zhì)穩(wěn)定,、來源豐富、價格不貴,、ELISA檢測試劑盒制備成的酶標(biāo)抗體或抗原性質(zhì)穩(wěn)定,，繼續(xù)保留著它的活性部分和催化能力。在受檢標(biāo)本中不存在與標(biāo)記酶相同的酶,。另外它的相應(yīng)底物應(yīng)易于制備和保存,，價格低廉，有色產(chǎn)物易于測定,，光吸收高,。
