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需要明確液相色譜儀分離的幾個目的
液相色譜儀的原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù),、吸附能力等親和能力的不同來進行分離的。使用外力使含有樣品的流動相氣體,、液體,、通過一固 定于柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面,。當流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,，混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用,。
液相色譜儀方法建立實驗開始之前，應明確對方法的這些要求：
(1)主要目的是什么,？定量或定性,，還是定性、定量同時做,？
(2)是否有必要解析出樣品的所有成分,？譬如可能有必要分離出產(chǎn)品中的所有降解物或雜質(zhì)，以使含量測定結(jié)果更加可靠,，但卻沒必要將它們彼此分開,。
(3)如要求定量分析，準確度與精密度需多大,？樣品主要成分的精密度通常能達到±1—2%,，特別是不需樣品預處理的情況。
(4)特殊化合物可能會以不同的樣品形式出現(xiàn)(如：原料藥,，一種或多種形態(tài),，環(huán)保樣品等)。是否需要一種以上的HPLC方法,？單一方法分離不同形態(tài)樣品是否理想,？
(5)一次將分析多少樣品？當必須同時處理大量樣品時,，運行時間將變得非常重要,。
有時甚至為了縮短運行時間而以犧牲樣品分離度作代價，如縮短柱長或加快流速,。當一次分析的樣品數(shù)目超過10個,，運行時間一般應控制在20min以內(nèi)。
(6)將要使用該方法的實驗室中,，有哪些HPLC設備,？色譜柱能否恒溫系統(tǒng)能否做梯度洗脫？該方法是否可在不同設計與生產(chǎn)的設備上運行,？