液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng),、溫度控制系統(tǒng),、色譜柱、檢測(cè)器,、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成,。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,,具有高效、快速,、靈敏等特點(diǎn),。

液相色譜儀的用途:
1、在聚合物的分析中,,吸附色譜一般用來(lái)分離添加劑,,如偶氮染料、抗氧化劑,、表面活性劑等,,也可用于石油烴類的組成分析。
2,、用于氨基酸,、蛋白質(zhì)的分析,也適合于某些無(wú)機(jī)離子(NO3-,、SO42-,、Cl-等無(wú)機(jī)陰離子和Na+、Ca2+,、Mg2+,、K+等無(wú)機(jī)陽(yáng)離子)的分離和分析,具有十分重要的作用,。
3,、適用于水溶液的體系,又適用于有機(jī)溶劑的體系,。當(dāng)所用的洗脫劑為水溶液時(shí),,稱為凝膠過(guò)濾色譜,其在生物界的應(yīng)用比較多,。
液相色譜儀的操作步驟:
1,、準(zhǔn)備:
①準(zhǔn)備所需流動(dòng)相,,用合適的0.45濾膜過(guò)濾,,超聲脫氣20min;
?、诟鶕?jù)待測(cè)樣品的需要更換合適的色譜柱(注意方向)和定量環(huán),;
③配制樣品的標(biāo)準(zhǔn)溶液,,用合適的0.45um濾膜過(guò)濾,;
④檢查儀器各部件是否連接正常,,其中包括電源線,、數(shù)據(jù)線,、地線以及輸液管道。
2,、開(kāi)機(jī):
?、俳油娫矗淮未蜷_(kāi)檢測(cè)器,、輸液泵,,待檢測(cè)器自檢結(jié)束,顯示測(cè)量狀態(tài)時(shí)再打開(kāi)電腦,、打印機(jī)及電腦顯示器等,;
②更換流動(dòng)相并排氣泡,;
?、蹖⒐苈返牟讳P鋼過(guò)濾頭放入裝有準(zhǔn)備好的流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶中;
?、苣鏁r(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)泵的排空閥,,約半圈,之后擰松排空閥,;
?、莅摧斔捅茫╬urge)鍵,綠燈亮?xí)r開(kāi)始以5.0ml/min流速?zèng)_洗約2分鐘,,管路無(wú)氣泡時(shí)按下(stop)鍵,重新設(shè)定流速值,。
3,、設(shè)計(jì)參數(shù):
①流速設(shè)定
?、诓ㄩL(zhǎng)設(shè)定
?、墼O(shè)定完成按運(yùn)行(run)按鍵
④色譜工作站操作:依次執(zhí)行→打開(kāi)“在線工作站”→“通道1”→“OK”→“數(shù)據(jù)采集”后進(jìn)行零點(diǎn)校正,、查看基線,,確定基線穩(wěn)定后關(guān)閉查看基線可以進(jìn)樣。
進(jìn)樣后進(jìn)行采集,、預(yù)覽,、查看結(jié)果、打印
4,、進(jìn)樣:
?、龠M(jìn)樣前將(A/Z)檢測(cè)器按鍵調(diào)零查看基數(shù)是否在0mv,有偏差則(零點(diǎn)校正)按鍵進(jìn)行調(diào)試
?、谟脴悠非逑醋⑸淦?、排除氣泡,、抽取適量后將手動(dòng)進(jìn)樣閥桿調(diào)到位置,樣品注入進(jìn)樣閥后調(diào)到(Inject)位置,,以此進(jìn)樣操作步驟完成,,進(jìn)入在線工作站自動(dòng)采集數(shù)據(jù)流程。
5,、系統(tǒng)清洗:
由于分析樣品時(shí)流動(dòng)相系統(tǒng)中含有緩沖鹽類物質(zhì),,需使用10%甲醇水溶液,以1.0ml/min沖洗40分鐘后更換甲醇試劑,,以同樣1.0ml/min沖洗40分鐘,,停泵,關(guān)機(jī),。