C18色譜柱因鍵合方式的不同,、粒徑的不同,、長(zhǎng)度的不同，內(nèi)徑的差異等多方面因素,，呈現(xiàn)出不同選擇性,。這樣，在市場(chǎng)上就出現(xiàn)了數(shù)百種具有不同分離選擇特性的C18色譜柱,。

對(duì)于傳統(tǒng)的C18色譜柱,，pH值使用范圍通常為2～7，因?yàn)閜H值高于8時(shí)C18固定相會(huì)受到限制,。由于殘余硅羥基的存在,，易對(duì)堿性化合物造成不可逆吸附，造成峰拖尾,，影響分離與分析,。pH值太低則會(huì)使鍵合的烷基脫落，而且對(duì)成分的分離達(dá)不到要求,。

1,、酸性條件下C18的選擇

為了改善C18色譜柱在低pH值時(shí)的穩(wěn)定性，有人提出了空間位阻方法,。

空間位阻作用是指連接較大基團(tuán),，立體阻礙溶質(zhì)基團(tuán)進(jìn)攻硅醇基,，使硅氧烷能夠再生，提高了化學(xué)鍵合固定相抗水解的能力,。

還有人制備了側(cè)鏈中含有異丙基或異丁基的C18化學(xué)鍵合固定相,。該固定相由于引入了較大的側(cè)鏈基團(tuán)，立體阻礙了殘留硅醇基與溶質(zhì)之間的相互作用,，在低pH值條件下能夠保持穩(wěn)定,，這種化學(xué)鍵合固定相更適合酸性物質(zhì)的分離。

Zorbax Stable Bond C18色譜柱就使用了空間位阻技術(shù),，其使用單官能團(tuán)硅烷,，具有較大的二異丁基(SB-C18)側(cè)鏈基團(tuán)，空間位阻關(guān)鍵的硅氧烷鍵合到硅膠表面,，以避免在低pH值條件下水解破壞,，在酸性流動(dòng)相條件下提供良好的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性。因此,，Stable Bond色譜柱成為低pH值方法開(kāi)發(fā)的很好的選擇,。在方法開(kāi)發(fā)初期，若選定流動(dòng)相為酸性,，可將此類色譜柱作為很好的選擇,。

2、堿性條件下C18的選擇

制造快速分離堿性化合物的化學(xué)鍵合相一直是研究熱點(diǎn),。

雙齒鍵合固定相的每個(gè)硅烷化分子中含有兩個(gè)硅原子,，兩個(gè)硅原子之間以-O-或-CH2-CH2等基團(tuán)連接，每個(gè)硅原子含有1個(gè)C18官能團(tuán),。它的環(huán)狀結(jié)構(gòu)無(wú)論在低pH值條件下,，還是高pH值條件下均顯示了較高的穩(wěn)定性和滿意的柱效。

與傳統(tǒng)的單齒化學(xué)鍵合相相比,，這種化學(xué)鍵合固定相突出的優(yōu)點(diǎn)是在低,、中、高pH值時(shí)都有很好的穩(wěn)定性,。使用C18雙齒化學(xué)鍵合固定相的商品柱有Zorbax Extend-C18色譜柱,，其耐受pH值達(dá)11.5，特別適合在高pH值的流動(dòng)相條件下對(duì)強(qiáng)堿性化合物進(jìn)行有效的色譜分離,。