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高效液相色譜使用過程中,，經(jīng)常會遇到一些操作及維護問題，為使HPLC系統(tǒng)良好運行,，其中一個很重要的事情就是保持系統(tǒng)的清潔,。因此,，應(yīng)關(guān)注流動相流經(jīng)該系統(tǒng)的所有地方,，對于這些地方經(jīng)常性的沖洗。
1,、流動相儲液瓶
首先要經(jīng)常清洗流動相儲液瓶,，或者每做一批新樣品更換一次流動相。一個臟的儲液瓶將會污染注入的流動相,。建議儲液瓶中緩沖液使用時間不要超過一周,，而有機溶劑使用時間不要超過一個月。也有人建議儲液瓶中保持用溶劑充滿,，直到更換分析方法儲液瓶需更換新溶劑（流動相組成發(fā)生變化）時,，將舊溶劑倒掉更換新溶劑，這樣勝于將溶劑用完,。但這對于分析樣品量少的實驗室而言似乎有些浪費,。儀器公司的工程師建議儲水瓶的水要天天換，每周瓶子還應(yīng)該用異丙醇清洗一次,。有的實驗室則在水里加入0.1～1 mM的甲酸抑制微生物的生長,。這些做法看起來有些繁瑣，但卻能起到“磨刀不誤砍柴工”作用,。
2,、泵
接下來要沖洗的是泵。千萬不要一分析完沖幾分鐘后就停泵,，特別是當(dāng)流動相中含有難揮發(fā)的緩沖液（如磷酸鹽）時,。如果儀器不是連續(xù)使用，當(dāng)流動相蒸發(fā)時，難揮發(fā)物就會粘在活塞密封墊的表面,，難揮發(fā)物將形成固形物沉淀,。這是泵密封墊磨損和單向閥滲漏的主要原因之一。所以,，無論使用長短,，在停泵以前一定要用非緩沖液流動相沖洗泵在半個小時以上，要是流動相中有難揮發(fā)緩沖鹽則建議沖洗的時間應(yīng)該更長些,。
3,、自動進樣器
自動進樣器也要按規(guī)定清洗。現(xiàn)在的儀器多配有自動進樣器的沖洗液瓶,，通常只要注意及時更換,、補充沖洗液即可。自動進樣器用的洗滌液也要采用與流動相相同的方式處理,，并根據(jù)溶劑的有效期和規(guī)定,，清洗儲液瓶或更換洗滌液。現(xiàn)在的自動進樣器設(shè)置,、操作都很簡單,，如果時間允許（特別是利用夜間運行），每次分析完后設(shè)置進1,、2針純?nèi)軇ㄈ缂状?、乙腈），也是一個好做法,。
4,、色譜柱
對柱子的污染是隨使用時間而增加。通常表現(xiàn)是：運行走基線時在記錄的色譜圖中基線噪音增加,，泵壓也增加,。解決這個問題的有效方法就是在每一批樣品分析結(jié)束后或準備卸下柱子時用大量的流動相沖洗柱子（例如，甲醇,、乙腈和水）,。用梯度沖洗效果更好，具體的比例要根據(jù)柱子的說明書和性質(zhì)而定,。
5,、檢測器
如果是正常使用，檢測器將依據(jù)其性質(zhì)并按照說明書規(guī)定進行洗,。例如UV/VIS檢測器或FL檢測器,，在對柱子和系統(tǒng)進行沖洗時也就一同對檢測器流通池中污染物進行了清洗。但是蒸發(fā)光檢測器或質(zhì)譜儀則需要按照說明書進行定期清洗,。這些檢測器在使用時會有難揮發(fā)污染物沉積,，如質(zhì)譜儀離子源的噴針、毛細管、錐孔板,、預(yù)四極等部件,，因而需要定期清洗。而且對連有這些檢測器的系統(tǒng)沖洗時,，最好與這些檢測器斷開,，以減少對檢測器的污染。
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