高效液相色譜儀是應(yīng)用高效液相色譜原理,,主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備,。它是由儲液器,、泵、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測器、記錄儀等幾部分組成,。目前可廣泛應(yīng)用于生命科學(xué),、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中,。下面我們就來了解一下高效液相色譜儀的操作方法,!

高效液相色譜儀的操作步驟:
1、過濾流動相,,根據(jù)需要選擇不同的濾膜(0.45um),。
2、對抽濾后的流動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘,。
3,、打開HPLC工作站,連接好流動相管道,,連接檢測系統(tǒng),。
4、進(jìn)入HPLC控制界面主菜單,,點(diǎn)擊manual,,進(jìn)入手動菜單。
5,、有一段時(shí)間沒用,,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥,。沖洗泵,,直接在泵的出水口,用針頭抽取,。沖洗進(jìn)樣閥,,需要在manual菜單下,先點(diǎn)擊purge,,再點(diǎn)擊start,,沖洗時(shí)速度不要超過10 ml/min,。
6、調(diào)節(jié)流量,,初次使用新的流動相,,可以先試一下壓力,流速越大,,壓力越大,,一般不要超過2000。點(diǎn)擊injure,,選用合適的流速,,點(diǎn)擊on,走基線,,觀察基線的情況,。
7、設(shè)計(jì)走樣方法,。點(diǎn)擊file,,選取select users and methods,可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法,。若需建立一個(gè)新的方法,,點(diǎn)擊new method。選取需要的配件,,包括進(jìn)樣閥,,泵,檢測器等,,根據(jù)需要而不同,。選完后,點(diǎn)擊protocol,。一個(gè)完整的走樣方法需要包括:
?、佟⑦M(jìn)樣前的穩(wěn)流,,一般2-5分鐘,;
②,、基線歸零,;
③,、進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換,;
④,、走樣時(shí)間,,隨不同的樣品而不同,。
8、進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作,。選定走樣方法,,點(diǎn)擊start。進(jìn)樣,,所有的樣品均需過濾。方法走完后,,點(diǎn)擊postrun,,可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后,,再用上面的方法走一段基線,,洗掉剩余物。
9,、關(guān)機(jī)時(shí),,先關(guān)計(jì)算機(jī),再關(guān)液相色譜,。