制備液相色譜儀是一種由儲(chǔ)液瓶,、高壓泵、進(jìn)樣系統(tǒng),、色譜柱,、檢測(cè)器、廢液瓶六部分組成的儀器,。

　　輸液泵是HPLC系統(tǒng)中zui重要的部件之一,。泵的性能好壞直接影響到整個(gè)系統(tǒng)的質(zhì)量和分析結(jié)果的可靠性。輸液泵應(yīng)具備如下性能：

　　1,、流量穩(wěn)定,，其RSD應(yīng)＜0.5%，這對(duì)定性定量的正確性至關(guān)重要,；

　　2,、流量范圍寬，分析型應(yīng)在0.1~10 ml/min范圍內(nèi)連續(xù)可調(diào),，制備型應(yīng)能達(dá)到100 ml/min,；

　　3、輸出壓力高,，一般應(yīng)能達(dá)到150~300 kg/cm2,；

　　4、液缸容積??；

　　5、密封性能好,，耐腐蝕,。

 

　　泵的種類很多,，按輸液性質(zhì)可分為恒壓泵和恒流泵。恒流泵按結(jié)構(gòu)又可分為螺旋注射泵,、柱塞往復(fù)泵和隔膜往復(fù)泵,。恒壓泵受柱阻影響，流量不穩(wěn)定,；螺旋泵缸體太大,，這兩種泵已被淘汰。目前應(yīng)用zui多的是柱塞往復(fù)泵,。

　　柱塞往復(fù)泵的液缸容積小,，可至0.1ml，因此易于清洗和更換活動(dòng)相,，特別適合于再循環(huán)和梯度洗脫,；改變電機(jī)轉(zhuǎn)速能方便地調(diào)節(jié)流量，流量不受柱阻影響,；泵壓可達(dá)400 kg/cm2,。其主要缺點(diǎn)是輸出的脈沖性較大，現(xiàn)多采用雙泵系統(tǒng)來(lái)克服,。雙泵按連接方式可分為并聯(lián)式和串聯(lián)式,，一般說(shuō)來(lái)并聯(lián)泵的流量重現(xiàn)性較好，但出故障的機(jī)會(huì)較多,，價(jià)格也較貴,。

　　早期使用隔膜和停流進(jìn)樣器，裝在色譜柱進(jìn)口處?，F(xiàn)在大都使用六通進(jìn)樣閥或自動(dòng)進(jìn)樣器,。進(jìn)樣裝置要求：密封性好，死體積小,，重復(fù)性好,，保證中心進(jìn)樣，進(jìn)樣時(shí)對(duì)色譜系統(tǒng)的壓力,、流量影響小,。HPLC進(jìn)樣方式可分為：隔膜進(jìn)樣、停流進(jìn)樣,、閥進(jìn)樣、自動(dòng)進(jìn)樣,。

　　1,、隔膜進(jìn)樣：用微量注射器將樣品注進(jìn)專門(mén)設(shè)計(jì)的與色譜柱相連的進(jìn)樣頭內(nèi)，可把樣品直接送到柱頭填充床的中心,，死體積幾乎即是零,，可以獲得*的柱效,，且價(jià)格便宜，操縱方便,。但不能在高壓下使用（如10MPa以上）,；此外隔膜輕易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應(yīng)，使進(jìn)樣重復(fù)性只能達(dá)到1~2%,；加之能耐各種溶劑的橡皮不易找到,，常規(guī)分析使用受到限制。

　　2,、停流進(jìn)樣：可避免在高壓下進(jìn)樣,。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新啟動(dòng)時(shí)往往會(huì)出現(xiàn)“鬼峰”,；另一缺點(diǎn)是保存時(shí)間不準(zhǔn),。在以峰的始末信號(hào)控制餾分收集的制備色譜中，效果較好,。

　　3,、閥進(jìn)樣：一般HPLC分析常用六通進(jìn)樣閥，其關(guān)鍵部件由圓形密封墊和固定底座組成,。由于閥接頭和連接管死體積的存在,，柱效率低于隔膜進(jìn)樣，但耐高壓,，進(jìn)樣量正確,，重復(fù)性好（0.5%），操縱方便,。

　　4,、自動(dòng)進(jìn)樣：用于大量樣品的常規(guī)分析。