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上海伍豐科學(xué)儀器有限公司

HPLC中常用的檢測(cè)器種類有哪些

時(shí)間:2020-6-3 閱讀:19529
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檢測(cè)器是用來(lái)連續(xù)監(jiān)測(cè)經(jīng)色譜柱分離后的流出物的組成和含量變化的裝置,。作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測(cè)的信號(hào),,常用檢測(cè)器有紫外吸收、熒光,、示差折光,、化學(xué)發(fā)光等。

1,、紫外可見(jiàn)吸收檢測(cè)器(ultraviolet-visibledetector,,UVD)

紫外可見(jiàn)吸收檢測(cè)器(UVD)是HPLC中應(yīng)用較廣泛的檢測(cè)器之一,幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測(cè)器,。其特點(diǎn)是靈敏度較高,,線性范圍寬,噪聲低,,適用于梯度洗脫,,對(duì)強(qiáng)吸收物質(zhì)檢測(cè)限可達(dá)1ng,檢測(cè)后不破壞樣品,,可用于制備,,并能與任何檢測(cè)器串聯(lián)使用。紫外可見(jiàn)檢測(cè)器的工作原理與結(jié)構(gòu)同一般分光光度計(jì)相似,,實(shí)際上就是裝有流動(dòng)池的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),。
 

2、熒光檢測(cè)器(fluorescence detector,,F(xiàn)D)

是一種高靈敏度,、有選擇性的檢測(cè)器,,可檢測(cè)能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過(guò)化學(xué)衍化生成熒光衍生物,,再進(jìn)行熒光檢測(cè),。其小檢測(cè)濃度可達(dá)0.1ng/ml,適用于痕量分析,;一般情況下熒光檢測(cè)器的靈敏度比紫外檢測(cè)器約高2個(gè)數(shù)量級(jí),,但其線性范圍不如紫外檢測(cè)器寬。近年來(lái),,采用激光作為熒光檢測(cè)器的光源而產(chǎn)生的激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器極大地增強(qiáng)了熒光檢測(cè)的信噪比,,因而具有很高的靈敏度,在痕量和超痕量分析中得到廣泛應(yīng)用,。     
 

3,、示差折光檢測(cè)器(differential refractive Index detector,RID)

示差折光檢測(cè)器是一種濃度型通用檢測(cè)器,,對(duì)所有溶質(zhì)都有響應(yīng),,某些不能用選擇性檢測(cè)器檢測(cè)的組分,如高分子化合物,、糖類,、脂肪烷烴等,可用示差檢測(cè)器檢測(cè),。示差檢測(cè)器是基于連續(xù)測(cè)定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來(lái)測(cè)定樣品含量的,。光從一種介質(zhì)進(jìn)入另一種介質(zhì)時(shí),由于兩種物質(zhì)的折射率不同就會(huì)產(chǎn)生折射,。只要樣品組分與流動(dòng)相的折光指數(shù)不同,,就可被檢測(cè),二者相差愈大,,靈敏度愈高,,在一定濃度范圍內(nèi)檢測(cè)器的輸出與溶質(zhì)濃度成正比。
 

4,、電化學(xué)檢測(cè)器(elec-chemical detector,,ED)

 

電化學(xué)檢測(cè)器主要有安培、極譜,、庫(kù)侖,、電位、電導(dǎo)等檢測(cè)器,,屬選擇性檢測(cè)器,,可檢測(cè)具有電活性的化合物。目前它已在各種無(wú)機(jī)和有機(jī)陰陽(yáng)離子,、生物組織和體液的代謝物,、食品添加劑,、環(huán)境污染物、生化制品,、農(nóng)藥及醫(yī)藥等的測(cè)定中獲得了廣泛的應(yīng)用,。其中,電導(dǎo)檢測(cè)器在離子色譜中應(yīng)用較多,。
 

5,、化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器(c iluminescence detector,CD)

化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種快速,、靈敏的新型檢測(cè)器,,其設(shè)備簡(jiǎn)單,具有價(jià)廉,、線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn),。其原理是基于某些物質(zhì)在常溫下進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),生成處于激發(fā)態(tài)勢(shì)反應(yīng)中間體或反應(yīng)產(chǎn)物,,當(dāng)它們從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時(shí),,就發(fā)射出光子。由于物質(zhì)激發(fā)態(tài)的能量是來(lái)自化學(xué)反應(yīng),,故叫作化學(xué)發(fā)光,。當(dāng)分離組分從色譜柱中洗脫出來(lái)后,立即與適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)發(fā)光試劑混合,,引起化學(xué)反應(yīng),,導(dǎo)致發(fā)光物質(zhì)產(chǎn)生輻射,其光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度成正比,。

這種檢測(cè)器不需要光源,也不需要復(fù)雜的光學(xué)系統(tǒng),,只要有恒流泵,,將化學(xué)發(fā)光試劑以一定的流速泵入混合器中,使之與柱流出物迅速而又均勻地混合產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,,通過(guò)光電倍增管將光信號(hào)變成電信號(hào),,就可進(jìn)行檢測(cè)。

 

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