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色譜柱日常維護(hù)
每天用足夠的時(shí)間來維護(hù)色譜柱,,您將節(jié)省更多有利于處理色譜柱故障的時(shí)間,,調(diào)試您的色譜柱的壽命也會(huì)變得更長,,色譜柱的使用壽命,除了與所分析的樣品和流動(dòng)相及使用頻率有關(guān),,zui主要的是與日常維護(hù)密切相關(guān),。色譜柱的使用壽命主要根據(jù)柱效和柱壓兩個(gè)指標(biāo)來衡量,如果一支色譜柱的柱效太低或者太高,,通常被認(rèn)為該色譜柱的使用壽命已盡結(jié)束,。因此,延長色譜柱的使用壽命關(guān)鍵是,,清除引起柱效下降和柱壓升高的因素,,通過以下幾點(diǎn)幫戰(zhàn)您完成色譜柱的日常維護(hù)工作。
一,、流動(dòng)相的pH應(yīng)在使用范圍內(nèi)
以硅膠為基質(zhì)的反相色譜柱的pH范圍為2~9,,流動(dòng)相超過其pH范圍將會(huì)導(dǎo)致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相碳鏈斷裂,使柱效下降,,壽命變短,。
二、去除樣品和流動(dòng)相匯總的固體顆粒
樣品和流動(dòng)相中含有固體顆粒物質(zhì)會(huì)堵塞色譜柱篩板,,不僅會(huì)引起柱壓的升高,,而且也會(huì)引起柱效下降。因此,建議使用超純水和色譜純?cè)噭?,在分析前?duì)樣品進(jìn)行針筒過濾,,流動(dòng)相過0.45um濾膜。
三,、使用保護(hù)柱或在線過濾器
保護(hù)柱和在線過濾器上都有篩板,,其孔徑與色譜柱篩板孔徑相同,因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達(dá)色譜柱,,有效防止色譜柱篩板的堵塞,。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例,因此除對(duì)樣品和流動(dòng)相進(jìn)行過濾外,,建議您在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線過濾器,。
四、正確使用緩沖鹽
緩沖鹽使用不當(dāng)會(huì)使其在流動(dòng)相(含有機(jī)溶劑)中析出,,堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙,,使填料板結(jié),柱壓上升,;同時(shí)阻礙了基質(zhì)上的鍵合的碳鏈自由舒展,,使用色譜柱的保留能力下降,柱效降低,。
建議使用前要過濾,,使用后要沖洗。具體方法如下:
1,、等度條件:使用緩沖鹽前和使用后需要過濾流動(dòng)相1.0ml/min流速?zèng)_洗60min.
2,、梯度條件:用含有緩沖鹽的流動(dòng)相跑梯度之前,用與初始流動(dòng)相組成相同的過濾流動(dòng)相似1.0ml/min流速?zèng)_洗60min,;分析完成后,,再用該過濾流動(dòng)以1.0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動(dòng)相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,,以避免梯度過程中緩沖鹽析出,。
五、柱清洗方法:
1,、未使用緩沖鹽:每天分析完成后,,用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱60min,。
2,、使用過緩沖鹽:分析完成后,先后用上述方法除去緩沖鹽,,然后再用純甲醇或乙腈反向沖洗色譜柱60min,。
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