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HPLC(液相色譜)是實驗室重要的 “分離”手段,,而色譜柱則堪稱分離的心臟。日常使用HPLC不免會遇到由色譜柱引起的各種故障,,因此提前做好維護保養(yǎng)色譜柱的工作十分重要,。
一、試驗樣品需過濾
若試驗樣品中的不溶物進入色譜柱,,則會引起入口過濾器及填料堵塞,,柱壓上升,從而破壞分離,,因此樣品應(yīng)盡可能以清潔的狀態(tài)注入。不論在什么情況下,,建議用0.5µm左右的過濾器過濾一下樣品,。
二、謹防色譜柱污染
有時樣品經(jīng)過過濾,,仍會發(fā)生色譜柱堵塞,、污染等情況,這可能是由于樣品中存在的夾雜物使溶解性差的成分向流動相析離,、被填料牢固保持的夾雜成分的吸附,、微型注射器污染等原因引起的。所以在分析前使用過濾器和防護柱,,將這些污染盡可能地除去,,過濾器中通常裝有孔徑為 1µm 左右的濾網(wǎng),可有效除去引起堵塞的物質(zhì),;防護柱是安裝在分析柱前面的短柱,,起到捕捉牢固吸附于填料上夾雜成分的作用。
三,、保證色譜柱潔凈
上面提到的防護柱其清除污染的作用有限,,因此色譜柱在使用之后,當根據(jù)樣品的不同,在每數(shù)次分析樣品之后進行一次清洗,。
四,、色譜柱輕拿輕放
色譜柱中填滿了數(shù)微米大小的細小粒子,應(yīng)避免沖擊和外部壓力的急劇變化,,防止損傷柱子,。
五、確認流動相的制約
有時色譜柱會因流動相的pH,、有機溶劑量等受到制約,,因此需充分確認之后再使用。
六,、按需要使用不同的色譜柱
若一支色譜柱用于各種分析,,則前面的測試數(shù)據(jù)有時不會重現(xiàn)。此外,,如果重復進行流動相條件差別較大的分析,,也會加速色譜柱的劣化。因此請務(wù)必做好各個色譜柱的使用記錄,。
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