目前,在梯度高效液相色譜儀中常用的進樣閥是7725型進樣閥,,其內(nèi)部的六通閥結(jié)構(gòu)使進樣操作非常方便,,但是,如果使用不當,,也會帶來問題,。
例如,在梯度高效液相色譜儀試驗過程中,,有時會有異常色譜峰的出現(xiàn)以及重現(xiàn)性不好的問題,,這主要是由于操作方法不當所引起,要想解決此類問題,,需從以下幾個方面入手:
1,、進樣量的控制
用進樣閥來進樣時,閥內(nèi)的樣品環(huán)是定量的,,(一般分析型進樣閥的樣品環(huán)體積為20ul),由于進樣時,,注射到進樣閥內(nèi)的樣品溶液在樣品環(huán)的管路中有徑向的速度梯度,。因此,要想使樣品環(huán)中充滿樣品溶液,,從而使用進樣閥來準確地定量,,則必須使進樣量大于樣品環(huán)體積的2倍。
如果用注射器來控制進樣量,,則只能注射樣品環(huán)體積1/2的量,,這樣才能防止部分樣品由溢流管溢出從而導致定量分析的誤差。
2,、進樣閥的清潔問題
如果樣品環(huán)中有上次進樣時樣品的殘留,,必然會污染下次注射進的樣品,為防止這種現(xiàn)象的發(fā)生,,應按下列步驟操作:
a.進樣閥有2個位置,,INJECT和LOAD。首先在LOAD位置時,,以注射器將流動相注入進樣閥內(nèi)清洗幾次,,每次用量大約40ul;
b.然后將進樣閥板手扳至INJECT位置時,,再以流動相清洗幾次,,每次用量還是40ul,;
c.再將樣品注射到進樣閥里。
按照上述的步驟操作,,可以避免由進樣閥引起的污染,,從而使干擾峰消除并提高分析結(jié)果的準確性。
3,、進樣閥溢流管的堵塞
有時,,進樣閥的溢流管會發(fā)生堵塞現(xiàn)象,向進樣閥內(nèi)注射樣品時,,注射針推不動,。此故障是由于溢流管的堵塞所致。堵塞的原因多半是由于溶解樣品的流動相用的是鹽溶液,,而其中的鹽在溢流管的排空端口處結(jié)晶所致,。
此時,可用小燒杯盛少量蒸餾水對溢流管口稍加浸泡,,端口處鹽的結(jié)晶就能被溶解掉,,故障排除。如能在每次進樣完成之后,,用蒸餾水反復沖洗至溢流管中的鹽分全部沖出,,則可避免梯度高效液相色譜儀故障的發(fā)生。
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