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簡(jiǎn)介--顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)組成部分

時(shí)間:2013-10-16閱讀:1663
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       顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)主要包括物鏡,、目鏡,、反光鏡和聚光器四個(gè)部件,。廣義的說(shuō)也包括照明光源,、濾光器,、蓋玻片和載玻片等,。
(一)、物鏡
物鏡是決定顯微鏡性能的zui重要部件,安裝在物鏡轉(zhuǎn)換器上,,接近被觀(guān)察的物體,,故叫做物鏡或接物鏡。
1,、物鏡的分類(lèi)
物鏡根據(jù)使用條件的不同可分為干燥物鏡和浸液物鏡,;其中浸液物鏡又可分為水浸物鏡和油浸物鏡(常用放大倍數(shù)為90—100倍)。
根據(jù)放大倍數(shù)的不同可分為 低倍物鏡(10倍以下),、中倍物鏡(20倍左右)高倍物鏡(40—65倍),。
根據(jù)像差矯正情況,分為消色差物鏡(常用,,能矯正光譜中兩種色光的色差的物鏡)和復(fù)色差物鏡(能矯正光譜中三種色光的色差的物鏡,,價(jià)格貴,使用少),。
(所謂象差是指所成的像與原物在形狀上的差別,;色差是指所成的像與原物在顏色上的差別)

(消除色差(當(dāng)不同波長(zhǎng)的光線(xiàn)通過(guò)透鏡的時(shí)候,它們折射的方向略有不同,,這導(dǎo)致了成像質(zhì)量的下降)
2,、物鏡的主要參數(shù):
物鏡主要參數(shù)包括:放大倍數(shù)、數(shù)值孔徑和工作距離,。
①,、放大倍數(shù)是指眼睛看到像的大小與對(duì)應(yīng)標(biāo)本大小的比值。它指的是長(zhǎng)度的比值而不是面積的比值,。例:放大倍數(shù)為100×,,指的是長(zhǎng)度是1μm的標(biāo)本,放大后像的長(zhǎng)度是100μm,,要是以面積計(jì)算,,則放大了10,000倍。
顯微鏡的總放大倍數(shù)等于物鏡和目鏡放大倍數(shù)的乘積,。
②,、數(shù)值孔徑也叫鏡口率,簡(jiǎn)寫(xiě)N•A 或A,,是物鏡和聚光器的主要參數(shù),,與顯微鏡的分辨力成正比。干燥物鏡的數(shù)值孔徑為0.05-0.95,,油浸物鏡(香柏油)的數(shù)值孔徑為1.25。
③,、工作距離是指當(dāng)所觀(guān)察的標(biāo)本zui清楚時(shí)物鏡的前端透鏡下面到標(biāo)本的蓋玻片上面的距離,。物鏡的工作距離與物鏡的焦距有關(guān),物鏡的焦距越長(zhǎng),放大倍數(shù)越低,,其工作距離越長(zhǎng),。例:10倍物鏡上標(biāo)有10/0.25和160/0.17,其中10為物鏡的放大倍數(shù),;0.25為數(shù)值孔徑,;160為鏡筒長(zhǎng)度(單位mm);0.17為蓋玻片的標(biāo)準(zhǔn)厚度(單位 mm),。10倍物鏡有效工作距離為6.5mm,,40倍物鏡有效工作距離為0.48mm 。
3,、物鏡的作用是將標(biāo)本作*次放大,,它是決定顯微鏡性能的zui重要的部件——分辨力的高低。
分辨力也叫分辨率或分辨本領(lǐng),。分辨力的大小是用分辨距離(所能分辨開(kāi)的兩個(gè)物點(diǎn)間的zui小距離)的數(shù)值來(lái)表示的,。在明視距離(25cm)之處,正常人眼所能看清相距0.073mm的兩個(gè)物點(diǎn),,這個(gè)0.073mm的數(shù)值,,即為正常人眼的分辨距離。顯微鏡的分辨距離越小,,即表示它的分辨力越高,,也就是表示它的性能越好。
顯微鏡的分辨力的大小由物鏡的分辨力來(lái)決定的,,而物鏡的分辨力又是由它的數(shù)值孔徑和照明光線(xiàn)的波長(zhǎng)決定的,。
當(dāng)用普通的中央照明法(使光線(xiàn)均勻地透過(guò)標(biāo)本的明視照明法)時(shí),顯微鏡的分辨距離為d=0.61λ/N•A
式中d——物鏡的分辨距離,,單位  nm,。
    λ——照明光線(xiàn)波長(zhǎng),單位  nm,。
    N•A ——物鏡的數(shù)值孔徑
例如油浸物鏡的數(shù)值孔徑為1.25,,可見(jiàn)光波長(zhǎng)范圍為400—700nm ,取其平均波長(zhǎng)550 nm,,則d=270 nm,,約等于照明光線(xiàn)波長(zhǎng)一半。一般地,,用可見(jiàn)光照明的顯微鏡分辨力的極限是0.2μm,。
(二)、目鏡
因?yàn)樗拷^(guān)察者的眼睛,,因此也叫接目鏡,。安裝在鏡筒的上端。
1、目鏡的結(jié)構(gòu)
通常目鏡由上下兩組透鏡組成,,上面的透鏡叫做接目透鏡,,下面的透鏡叫做會(huì)聚透鏡或場(chǎng)鏡。上下透鏡之間或場(chǎng)鏡下面裝有一個(gè)光闌(它的大小決定了視場(chǎng)的大?。?,因?yàn)闃?biāo)本正好在光闌面上成像,可在這個(gè)光闌上粘一小段毛發(fā)作為指針,,用來(lái)指示某個(gè)特點(diǎn)的目標(biāo),。也可在其上面放置目鏡測(cè)微尺,用來(lái)測(cè)量所觀(guān)察標(biāo)本的大小,。
目鏡的長(zhǎng)度越短,,放大倍數(shù)越大(因目鏡的放大倍數(shù)與目鏡的焦距成反比)。
2,、目鏡的作用
是將已被物鏡放大的,,分辨清晰的實(shí)像進(jìn)一步放大,達(dá)到人眼能容易分辨清楚的程度,。
常用目鏡的放大倍數(shù)為5—16倍,。
3、目鏡與物鏡的關(guān)系
物鏡已經(jīng)分辨清楚的細(xì)微結(jié)構(gòu),,假如沒(méi)有經(jīng)過(guò)目鏡的再放大,,達(dá)不到人眼所能分辨的大小,那就看不清楚,;但物鏡所不能分辨的細(xì)微結(jié)構(gòu),,雖然經(jīng)過(guò)高倍目鏡的再放大,也還是看不清楚,,所以目鏡只能起放大作用,,不會(huì)提高顯微鏡的分辨率。有時(shí)雖然物鏡能分辨開(kāi)兩個(gè)靠得很近的物點(diǎn),,但由于這兩個(gè)物點(diǎn)的像的距離小于眼睛的分辨距離,,還是無(wú)法看清。所以,,目鏡和物鏡即相互,,又彼此制約。
(三),、聚光器
聚光器也叫集光器,。位于標(biāo)本下方的聚光器支架上。它主要由聚光鏡和可變光闌組成,。其中,,聚光鏡可分為明視場(chǎng)聚光鏡(普通顯微鏡配置)和暗視場(chǎng)聚光鏡,。
1、光鏡的主要參數(shù)
數(shù)值孔徑(N•A )是聚光鏡的主要參數(shù),,zui大數(shù)值孔徑一般是1.2—1.4,數(shù)值孔徑有一定的可變范圍,,通??淘谏戏酵哥R邊框上的數(shù)字是代表zui大的數(shù)值孔徑,通過(guò)調(diào)節(jié)下部可變光闌的開(kāi)放程度,,可得到此數(shù)字以下的各種不同的數(shù)值孔徑,,以適應(yīng)不同物鏡的需要。有的聚光鏡由幾組透鏡組成,,zui上面的一組透鏡可以卸掉或移出光路,,使聚光鏡的數(shù)值孔徑變小,以適應(yīng)低倍物鏡觀(guān)察時(shí)的照明,。
2,、聚光鏡的作用
聚光鏡的作用相當(dāng)于凸透鏡,起會(huì)聚光線(xiàn)的作用,,以增強(qiáng)標(biāo)本的照明,。一般地把聚光鏡的聚光焦點(diǎn)設(shè)計(jì)在它上端透鏡平面上方約1.25mm處。(聚光焦點(diǎn)正在所要觀(guān)察的標(biāo)本上,,載玻片的厚度為1.1mm左右)
3,、可變光闌
可變光闌也叫光圈,位于聚光鏡的下方,,由十幾張金屬薄片組成,,中心部分形成圓孔。其作用是調(diào)節(jié)光強(qiáng)度和使聚光鏡的數(shù)值孔徑與物鏡的數(shù)值孔徑相適應(yīng),??勺児怅@開(kāi)得越大,數(shù)值孔徑越大(觀(guān)察完畢后,,應(yīng)將光圈調(diào)至zui大),。
在可變光闌下面,還有一個(gè)圓形的濾光片托架,。
(四)反光鏡
反光鏡是一個(gè)可以隨意轉(zhuǎn)動(dòng)的雙面鏡,,直徑為50mm,一面為平面,,一面為凹面,,其作用是將從任何方向射來(lái)的光線(xiàn)經(jīng)通光孔反射上來(lái)。平面鏡反射光線(xiàn)的能力較弱,,是在光線(xiàn)較強(qiáng)時(shí)使用,,凹面鏡反射光線(xiàn)的能力較強(qiáng),,是在光線(xiàn)較弱時(shí)使用。
反光鏡通常一面是平面鏡,,另一面是凹面鏡,,裝在聚光器下面,可以在水平與垂直兩個(gè)方向上任意旋轉(zhuǎn),。
反光鏡的作用是使由光源發(fā)出的光線(xiàn)或天然光射向聚光器,。當(dāng)用聚光器時(shí)一般用平面鏡,不用時(shí)用凹面鏡,;當(dāng)光線(xiàn)強(qiáng)時(shí)用平面鏡,,弱時(shí)用凹面鏡。
觀(guān)察完畢后,,應(yīng)將反光鏡垂直放置,。
(五)照明光源
顯微鏡的照明可以用天然光源或人工光源

1、天然光源
光線(xiàn)來(lái)自天空,,是由白云反射來(lái)的,。不可利用直接照來(lái)的太陽(yáng)光。

 2,、人工光源
①,、對(duì)人工光源的基本要求:有足夠的發(fā)光強(qiáng)度;光源發(fā)熱不能過(guò)多,。
②,、常用的人工光源:顯微鏡燈;日光燈
(六)濾光器
安裝在光源和聚光器之間,。作用是讓所選擇的某一波段的光線(xiàn)通過(guò),,而吸收掉其他的光線(xiàn),即為了改變光線(xiàn)的光譜成分或削弱光的強(qiáng)度,。分為兩大類(lèi):濾光片和液體濾光器,。
(七)蓋玻片和載玻片
蓋玻片和載玻片的表面應(yīng)相當(dāng)平坦,無(wú)氣泡,,無(wú)劃痕,。選用無(wú)色,透明度好的,,使用前應(yīng)洗凈,。
蓋玻片的標(biāo)準(zhǔn)厚度是0.17±0.02mm,如不用蓋玻片或蓋玻片厚度不合適,,都回影響成像質(zhì)量,。
載玻片的標(biāo)準(zhǔn)厚度是1.1±0.04mm,一般可用范圍是1—1.2mm,,若太厚會(huì)影響聚光器效能,,太薄則容易破裂,。



 

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