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激光共聚焦顯微鏡的原理及優(yōu)點
閱讀：5928 發(fā)布時間：2016-6-20
激光共聚焦顯微鏡廠家LEXT OLS4100 全新的多層模式則可以識別多層樣品各層上反射光強度的峰值區(qū)域,，并將各層設(shè)為焦點,，這樣即可實現(xiàn)對透明樣品上表面的觀察和測量,，而且也可以對多層樣品的各層進行分析和厚度測量,。
激光共聚焦顯微鏡優(yōu)點
1,、以激光為光源,，在相應(yīng)的熒光探針標(biāo)記后，對樣本進行逐點掃描,，逐層獲得二維光學(xué)橫斷面圖像,，具有“細胞CT”的功能，并可通過計算機三維重建軟件支持,，獲得三維圖像,，并可以任意角度旋轉(zhuǎn)，觀察細胞,，組織立體形態(tài)和空間關(guān)系,；
2、可以對活細胞和組織進行無損傷的觀察,，動態(tài)測量細胞內(nèi)的Ca離子濃度和pH值等活細胞生理信息；
3,、可對細胞膜的流動性,，細胞間通訊,，細胞融合，細胞骨架彈性測量等,，可用作“光刀子”完成細胞內(nèi)“外科手術(shù)”,。這一技術(shù)可以對活細胞和組織進行原位動態(tài)定量的觀察和測量。
與傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡相比,， 激光共聚焦顯微鏡 具有更高的分辨率,，實現(xiàn)多重?zé)晒獾耐瑫r可觀察并可形成清晰的三維圖像等優(yōu)點
工作原理
傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡使用的是場光源，標(biāo)本上每一點的圖像都會受到鄰近點的衍射或散射光的干擾,；激光共聚焦顯微鏡利用激光束經(jīng)照明針孔形成點光源對標(biāo)本內(nèi)焦平面的每一點掃描,，標(biāo)本上的被照射點，在探測針孔處成像,，由探測針孔后的光點倍增管（PMT）或冷電耦器件（cCCD）逐點或逐線接收,，迅速在計算機監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像。照明針孔與探測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的,，焦平面上的點同時聚焦于照明針孔和發(fā)射針孔,，焦平面以外的點不會在探測針孔處成像，這樣得到的共聚焦圖像是標(biāo)本的光學(xué)橫斷面,，克服了普通顯微鏡圖像模糊的缺點,。
激光共聚焦顯微鏡是采用激光作為光源，在傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)上采用共軛聚焦原理和裝置,，并利用計算機對所觀察的對象進行數(shù)字圖象處理的一套觀察,、分析和輸出系統(tǒng)。把光學(xué)成像的分辨率提高了30%~40%,，使用紫外或可見光激發(fā)熒光探針,，從而得到細胞或組織內(nèi)部微細結(jié)構(gòu)的熒光圖像，在亞細胞水平上觀察生理信號及細胞形態(tài)的變化,，成為形態(tài)學(xué),，分子生物學(xué)，神經(jīng)科學(xué),，藥理學(xué),，遺傳學(xué)等領(lǐng)域中新一代的研究工具。
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