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顯微鏡的重要光學技術(shù)參數(shù)

閱讀:1181        發(fā)布時間:2011-1-21

      在鏡檢時,,人們總是希望能清晰而明亮的理想圖象,,這就需要顯微鏡的各項光學技術(shù)參數(shù)達到一定的標準,,并且要求在使用時,,必須根據(jù)鏡檢的目的和實際情況來協(xié)調(diào)各參數(shù)的關(guān)系,,只有這樣,,才能充分發(fā)揮顯微鏡應(yīng)有的性能,,得到滿意的鏡檢效果。


      顯微鏡的光學技術(shù)參數(shù)包括:數(shù)值孔徑,、分辨率,、放大率、焦深、視場寬度,、覆蓋差,、工作距離等等。這些參數(shù)并不都是越高越好,,它們之間是相互又相互制約的,,在使用時,應(yīng)根據(jù)鏡檢的目的和實際情況來協(xié)調(diào)參數(shù)間的關(guān)系,,但應(yīng)以保證分辨率為準,。

一、 數(shù)值孔徑

      數(shù)值孔徑簡寫N.A,,數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要技術(shù)參數(shù),,是判斷兩者(尤其對物鏡而言)性能高低的重要標志。其數(shù)值的大小,,分別標科在物鏡和聚光鏡的外殼上,。 數(shù)值孔徑(N.A)是物鏡前透鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率(h)和孔徑角(u)半數(shù)的正玄之乘積。用公式表示如下:

NA=hsinu/2

      孔徑角又稱"鏡口角",,是物鏡光軸上的物體點與物鏡前透鏡的有效直徑所形成的角度,??讖浇窃酱?,進入物鏡的光通亮就越大,它與物鏡的有效直徑成正比,,與焦點的距離成反比,。

顯微鏡觀察時,若想增大NA值,,孔徑角是無法增大的,,*的辦法是增大介質(zhì)的折射率h值?;谶@一原理,,就產(chǎn)生了水浸系物鏡和油浸物鏡,因介質(zhì)的折射率h值大于一,,NA值就能大于一,。

      數(shù)值孔徑zui大值為1.4,這個數(shù)值在理論上和技術(shù)上都達到了極限,。目前,,有用折射率高的溴萘作介質(zhì),溴萘的折射率為1.66,所以NA值可大于1.4,。α這里必須指出,,為了充分發(fā)揮物鏡數(shù)值孔徑的作用,在觀察時,聚光鏡的NA值應(yīng)等于或略大于物鏡的NA值,,數(shù)值孔徑與其他技術(shù)參數(shù)有著密切的關(guān)系,,它幾乎決定和影響著其他各項技術(shù)參數(shù)。它與分辨率成正比,,與放大率成正比,,與焦深成反比,NA值增大,,視場寬度與工作距離都會相應(yīng)地變小,。

 二、 分辨率

      分辨率又稱"鑒別率",,"解像力",。是衡量顯微鏡性能的又一個重要技術(shù)參數(shù)。
      顯微鏡的分辨率用公式表示為:d=l/NA

      公式中d為zui小分辨距離,;l為光線的波長,;NA為物鏡的數(shù)值孔徑??梢娢镧R的分辨率是由物鏡的NA值與照明光源的波長兩個因素決定,。NA值越大,照明光線波長越短,,則d值越小,,分辨率就越高。

      要提高分辨率,,即減小d值,,可采取以下措施

      1. 降低波長l值,使用短波長光源,。

      2.曾大介質(zhì)h值和提高NA值(NA=hsinu/2),。

      3.增大孔徑角。

      4.增加明暗反差,。


三,、放大率

      放大率就是放大倍數(shù),是指被檢驗物體經(jīng)物鏡放大再經(jīng)目鏡放大后,,人眼所看到的zui終圖象的大小對原物體大小的比值,,是物鏡和目鏡放大倍數(shù)的乘積。

      放大率也是顯微鏡的重要參數(shù),,但也不能盲目相信放大率越高越好,,在選擇時應(yīng)首先考慮物鏡的數(shù)值孔徑。


四,、 焦深

      焦深為焦點深度的簡稱,,即在使用顯微鏡時,,當焦點對準某一物體時,不僅位于該點平面上的各點都可以看清楚,,而且在此平面的上下一定厚度內(nèi),,也能看得清楚,這個清楚部分的厚度就是焦深,。焦深大, 可以看到被檢物體的全層,,而焦深小,則只能看到被檢物體的一薄層,,焦深與其他技術(shù)參數(shù)有以下關(guān)系:

      1.焦深與總放大倍數(shù)及物鏡的數(shù)值孔鏡成反比,。

      2.焦深大,分辨率降低,。

      由于低倍物鏡的景深較大,,所以在低倍物鏡照相時造成困難。在顯微照相時將詳細介紹,。


五,、視場直徑(Field of view)

      觀察顯微鏡時,所看到的明亮的原形范圍叫視場,,它的大小,,是由目鏡里的視場光闌決定的。

      視場直徑也稱視場寬度,,是指在顯微鏡下看到的圓形視場內(nèi)所能容納被檢物體的實際范圍,。視場直徑愈大,愈便于觀察,。

      F=FN/Mob

      F: 視場直徑,,F(xiàn)N:視場數(shù),,Mob:物鏡放大率,。

      視場數(shù)(Field Number, 簡寫為FN),標刻在目鏡的鏡筒外側(cè),。

      由公式可看出:

      1. 視場直徑與視場數(shù)成正比,。

      2. 增大物鏡的倍數(shù),則視場直徑減小,。因此,,若在低倍鏡下可以看到被檢物體的全貌,而換成高倍物鏡,,就只能看到被檢物體的很小一部份,。

六、覆蓋差

     顯微鏡的光學系統(tǒng)也包括蓋玻片在內(nèi),。由于蓋玻片的厚度不標準,,光線從蓋玻片進入空氣產(chǎn)生折射后的光路發(fā)生了改變,從而產(chǎn)生了相差,這就是覆蓋差,。覆蓋差的產(chǎn)生影響了顯微鏡的成響質(zhì)量,。

     上規(guī)定,蓋玻片的標準厚度為0.17mm, 許可范圍在0.16-0.18mm.,在物鏡的制造上已將此厚度范圍的相差計算在內(nèi),。物鏡外殼上標科的確0.17,即表明該物鏡要求蓋玻片的厚度,。

七、工作距離

     工作距離也叫物距,,即指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離,。鏡檢時,被檢物體應(yīng)處在物鏡的一倍至二倍焦距之間,。因此,,它與焦距是兩個概念,平時習慣所說的調(diào)焦,,實際上是調(diào)節(jié)工作距離,。

     在物鏡數(shù)值孔徑一定的情況下,工作距離短孔徑角則大,。

     數(shù)值孔徑大的高倍物鏡,,其工作距離小。

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