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主營(yíng)產(chǎn)品: elisa試劑盒,一抗,二抗,,抗體,ABI |
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人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒
Human secondary lymphoid-tissue chemokine,SLC ELISA Kit
包裝:96T/48T
檢測(cè)標(biāo)本:包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。
保存:2-8℃,,一年,。
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人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒 供應(yīng)商:
上海博耀生物科技公司是專(zhuān)業(yè)的ELISA試劑盒供應(yīng)商!本公司專(zhuān)業(yè)經(jīng)銷(xiāo)elisa試劑盒、omega試劑盒,、抗體,、動(dòng)物血清、標(biāo)準(zhǔn)品等生物試劑,產(chǎn)品質(zhì)量有保證,售后服務(wù)有保障,。垂詢(xún),!
相關(guān)知識(shí)>>>>>>>
液體類(lèi)標(biāo)本:
標(biāo)本必須為液體,不含沉淀,。包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。 1ml 的 全血可得到 0.5ml 的血清或血漿。每個(gè)標(biāo)本量收集體積= 100ul × 檢測(cè)種類(lèi),。取材前須向銷(xiāo)售人員索要說(shuō)明書(shū),。
血清:
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分),。收集上清,。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
試劑的準(zhǔn)備
1. 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,,不能儲(chǔ)存,。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
800 pg/ml (6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul,。
400 pg/ml (5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
200 pg/ml (4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100 pg/ml (3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
50 pg/ml (2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
25 pg/ml (1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0 pg/ml (空白對(duì)照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul,。
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。
操作步驟
1. 使用前,,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí),。
4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
6. 甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8. 取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果,。
9. 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul,、10ul,、50ul、100ul,、200,、500ul、1000ul,。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等,。
血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合10-20 分鐘后,,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形 成,,應(yīng)再次離心。
尿液,、胸腹水,、腦脊液:
用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分),。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。