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主營產(chǎn)品: elisa試劑盒,一抗,二抗,,抗體,ABI |
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人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA試劑盒
Human α-Synuclein,α-SYN ELISA Kit
包裝:96T/48T
檢測(cè)標(biāo)本:包括血清,、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。
保存:2-8℃,,一年,。
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人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA試劑盒 供應(yīng)商:
上海博耀生物科技公司是專業(yè)的ELISA試劑盒供應(yīng)商!本公司專業(yè)經(jīng)銷elisa試劑盒、omega試劑盒,、抗體,、動(dòng)物血清、標(biāo)準(zhǔn)品等生物試劑,產(chǎn)品質(zhì)量有保證,售后服務(wù)有保障,。垂詢,!
相關(guān)知識(shí)>>>>>>>
細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集,。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分),。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的 成份時(shí),,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀 釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬 /ml 左右。通過反復(fù)凍融,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,,稱取重量,。加入一定量的 PBS ,緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin ( 抑肽酶),。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻 漿充分,。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,,如有必要,,可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用,。
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
7. 底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,,避免長時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
8. 加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
9. 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7. 底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
8. 加入試劑的順序應(yīng)*,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9. 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
樣品收集、處理及保存方法
1,、 血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2、 血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3,、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4,、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,取上清液
5,、 保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
操作步驟
1. 使用前,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時(shí)。
4. 甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
7. 每孔加入底物A,、B各50ul,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘,。避免光照。
8. 取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9. 在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值,。