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人活化蛋白C抵抗素（APCR）ELISA試劑盒

Human activated protein C resistance,APCR ELISA Kit

包裝：96T/48T
檢測(cè)標(biāo)本：包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。
保存：2-8℃，一年,。

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人活化蛋白C抵抗素（APCR）ELISA試劑盒供應(yīng)商：

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相關(guān)知識(shí)>>>>>>>
操作注意事項(xiàng)
1． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存,。
2． 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存,，以免變質(zhì),。
3． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A、B液時(shí),，避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6． 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7． 底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸，有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
8． 加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
9． 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
試劑的準(zhǔn)備
1． 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,，不能儲(chǔ)存,。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：
800 pg/ml （6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul,。
400 pg/ml （5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
200 pg/ml （4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100 pg/ml （3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
50 pg/ml （2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
25 pg/ml （1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0 pg/ml （空白對(duì)照） 原始濃度不用稀釋直接加入50ul,。
2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

建議使用的實(shí)驗(yàn)方案
標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mIU/ml）
A 40 40 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
B 20 20 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
C 10 10 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
D 5.0 5.0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
E 2.5 2.5 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
F 1.25 1.25 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
G 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),，用無菌管收集,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的 成份時(shí),，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀 釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬 /ml 左右,。通過反復(fù)凍融,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）,。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后,，稱取重量。加入一定量的 PBS ，緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin （ 抑肽酶）,。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻 漿充分,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè),，其余冷凍備用,。
操作步驟：
參照說明書（具體說明書請(qǐng)發(fā)郵件::shkbsw）
靈敏度：
具體請(qǐng)查看說明書.
檢測(cè)范圍（RANGN）：
具體請(qǐng)查看說明書.
結(jié)果判定：
試驗(yàn)有效性：陽性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10
臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為人Hp-IgM陰性
陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為人Hp-IgM陽性