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主營(yíng)產(chǎn)品: elisa試劑盒,一抗,二抗,,抗體,ABI |
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人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒
Human transferrin receptor,TFR ELISA Kit
包裝:96T/48T
檢測(cè)標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。
保存:2-8℃,,一年,。
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人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒供應(yīng)商:
上海博耀生物科技公司是專(zhuān)業(yè)的ELISA試劑盒供應(yīng)商!本公司專(zhuān)業(yè)經(jīng)銷(xiāo)elisa試劑盒、omega試劑盒,、抗體,、動(dòng)物血清、標(biāo)準(zhǔn)品等生物試劑,產(chǎn)品質(zhì)量有保證,售后服務(wù)有保障,。垂詢(xún),!
相關(guān)知識(shí)>>>>>>>
細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集,。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分),。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的 成份時(shí),,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀 釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬(wàn) /ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量,。加入一定量的 PBS ,,緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin ( 抑肽酶),。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻 漿充分,。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,,如有必要,,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè),,其余冷凍備用,。
試劑的準(zhǔn)備
1. 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存,。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻,。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
800 pg/ml (6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
400 pg/ml (5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
200 pg/ml (4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100 pg/ml (3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
50 pg/ml (2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
25 pg/ml (1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) 100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0 pg/ml (空白對(duì)照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul,。
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋,。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
7. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應(yīng)*,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
9. 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
樣品收集,、處理及保存方法
1、 血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2,、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測(cè),。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3,、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,,取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。