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克隆化次數(shù)的多少由分泌能力強(qiáng)弱和抗原的免疫性強(qiáng)弱而決定,。一般說(shuō),,免疫性強(qiáng)的抗原克隆次數(shù)可少一些,,但至少要3~5次克隆才能穩(wěn)定,??寺』姆椒ê芏啵ㄓ邢尴♂尫?、顯微操作法,、軟瓊脂平板法及熒光激活分離法等。 zui初有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分,,故曾把抗體統(tǒng)稱(chēng)為丙種(γ)球蛋白,。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),。然后洗滌,。(同時(shí)做空白孔,,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。 (1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。所謂抗原的反應(yīng)原性是指能與由它刺激所產(chǎn)生的抗體或致敏淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性反應(yīng),。具備免疫原性和反應(yīng)原性兩種能力的物質(zhì)稱(chēng)為*抗原,如病原體,、異種動(dòng)物血清等,。在實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),,具體的方法步驟可有多種,。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等,。


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