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BY-4038R線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬氨酸/谷氨酸載體蛋白抗體
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2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌,。(同時(shí)做空白孔,,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。 具有抗原結(jié)合部位,,能與抗原分子上相應(yīng)表位發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),。然后洗滌,。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔),。 (4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無(wú)色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時(shí)間后,,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入,??乖拿庖邉┝渴且勒战o予動(dòng)物的種類、免疫周期以及所要求的抗體特性等不同而不同,。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示,。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,,計(jì)算各自的結(jié)合率,,求出各自在 IC50時(shí)的濃度,并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率,。


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