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BY-0473R溶質(zhì)攜帶物家族-1抗體
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產(chǎn)品名稱:Solute carrier family 1 溶質(zhì)攜帶物家族-1抗體
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BY-0473RSolute carrier family 1 溶質(zhì)攜帶物家族-1抗體
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3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌,。一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團(tuán),,而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)(底物和二抗)。 4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,,37℃10~30分鐘,。(3) 稀釋液: 牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 加洗滌緩沖液至100ml 或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用,??寺』螖?shù)的多少由分泌能力強(qiáng)弱和抗原的免疫性強(qiáng)弱而決定。一般說,免疫性強(qiáng)的抗原克隆次數(shù)可少一些,,但至少要3~5次克隆才能穩(wěn)定,。克隆化的方法很多,,包括有限稀釋法,、顯微操作法、軟瓊脂平板法及熒光激活分離法等,。 (4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無(wú)色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時(shí)間后,,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入,。


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