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BY-2073R磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗體
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BY-2073Rphospho-GSK3 Alpha/Beta(Tyr279+Tyr216) 磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗體
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(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無(wú)色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時(shí)間后,,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入,。一抗是針對(duì)抗原的抗體,,二抗是針對(duì)一抗的抗體。3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌,。單克隆抗體是只識(shí)別一種表位(抗原決定簇)的抗體,,來(lái)自單個(gè)B淋巴細(xì)胞的克隆或一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的克隆,。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定,。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在 IC50時(shí)的濃度,,并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率,。動(dòng)物脾臟有上百萬(wàn)種不同的B淋巴細(xì)胞系,具有不同基因不同的B淋巴細(xì)胞合成不同的抗體,。


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