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(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無(wú)色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時(shí)間,,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入,。第二抗體是能和抗體結(jié)合,即抗體的抗體,,其主要作用是檢測(cè)抗體的存在,,放大一抗的信號(hào)。zui多見的是“三抗"陽(yáng)性:“抗-HBs+,、抗-HBe,、和抗- HBc+",這說(shuō)明乙肝病毒感染結(jié)束,,體內(nèi)病毒清除,,提示這個(gè)人免疫功能十分正常,可以獻(xiàn)血,,也可以應(yīng)用他的血制造高效價(jià)乙肝免疫球蛋門(HBIG),,用于對(duì)乙肝的防治,。 3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。抗血清收獲后,,加 1/萬(wàn)硫柳汞或 1/萬(wàn)的疊氮鈉防腐,,或加入等量的中性甘油,分裝小瓶,,置-20℃以下的低溫保存,,數(shù)月至數(shù)年內(nèi)抗體效價(jià)無(wú)明顯變化。注意避免反復(fù)凍融,。根據(jù)抗原性質(zhì)分為兩類:*抗原和不*抗原,。 淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化*抗原(complete antigen) 簡(jiǎn)稱抗原。是一類既有免疫原性,,又有免疫反應(yīng)性的物質(zhì),。


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