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Anti-DR4/APO2  死亡受體4抗體
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標(biāo)記抗體:
   抗體經(jīng)過(guò)酶標(biāo)記,、鐵蛋白標(biāo)記或通過(guò)膠體金標(biāo)記獲得標(biāo)記抗體,是免疫電鏡樣品制備的一種方法,,用于觀察抗原抗體免疫復(fù)合物方面研究的手段,。
抗體的親和力 :
是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的,。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵、疏水鍵,、側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,,K的單位是L/mol,,通常K的范圍在 108 ~1010 /mol,也有多達(dá) 1014 /mol,??贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義,。<
抗體結(jié)構(gòu):
  抗體是具有4條多肽鏈的對(duì)稱結(jié)構(gòu),,其中2條較長(zhǎng)、相對(duì)分子量較大的相同的重鏈(H鏈),;2條較短,、相對(duì)分子量較小的相同的輕鏈(L鏈)。鏈間由二硫鍵和非共價(jià)鍵聯(lián)結(jié)形成一個(gè)由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子,。輕鏈有κ和λ兩種,,重鏈有μ、δ,、γ,、ε和α五種。 整個(gè)抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分,。在給定的物種中,,不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列??勺儏^(qū)位于"Y"的兩臂末端,。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強(qiáng)烈,這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū),。高變區(qū)位于分子表面,,zui多由17個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成,少則只有2 ~ 3個(gè),。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性,。一個(gè)抗體分子上的兩個(gè)抗原結(jié)合部位是相同的,位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段(antigen-binding fragment, Fab),。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段(crystalline fragment,FC),,糖結(jié)合在FC
單克隆抗體:
  (monoclonal antibody,,McAb)克隆選擇學(xué)說(shuō):淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體,,一種細(xì)胞帶一種受體,進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個(gè)別淋巴細(xì)胞,,使之活化,增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群,,分泌同樣的抗體,。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi),在機(jī)體中就會(huì)誘導(dǎo)出針對(duì)不同抗原決定簇的多種抗體,,如果要把這些抗體一一分開,,用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的。1975年科勒(Kohler)和米爾斯坦(Milstein)將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,,培養(yǎng)出既能迅速生長(zhǎng)無(wú)限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,。從而獲得針對(duì)某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體,。1995年,Katherine Knight博士在美國(guó)芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞(Plasmacytoma),,開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù),。與鼠單抗相比,兔單抗具有:首先,,兔抗血清通常含有高親和力抗體,,可以比鼠抗血清識(shí)別更多種類的表位;其次,,兔單克隆抗體能夠識(shí)別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原,;第三,由于兔脾臟較大,,可以更多進(jìn)行的融合試驗(yàn),,使得高通量篩選融合成
抗體的效價(jià)鑒定:
不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià),。不同的抗原制備的抗體,,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,,包括有試管凝集反應(yīng),、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等,。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定,。


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