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Anti-phospho-c-Jun/AP-1（Thr91+Thr93） 磷酸化原癌基因c-Jun抗體

一抗

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抗體的特異性鑒定 ：
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力,?？贵w的特異性高，它的識別能力就強,。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示,。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,，計算各自的結(jié)合率,，求出各自在 IC50時的濃度，并按下列公式計算交叉反應(yīng)率,。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,，而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時，表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,，即該血清的特異性較好,。<
生物活性：
　　（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,，通常需要補體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷,。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,，直接發(fā)揮中和病毒的作用,。 　
　（2）激活補體：IgM,、IgG1,、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體，凝聚的IgA,、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體,。
　　（3）結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白,，可結(jié)合不同種的細(xì)胞,，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答,。
　?。?）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫,。免疫球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜,，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
　?。?）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì),，也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能,。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性,。
　?。?）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞,。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),，均能破壞抗體的作用,?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,，再經(jīng)透析法將其純化。
　?。?）通過與細(xì)胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng) 　?、僬{(diào)理作用 　　IgG、IgM的Fc段與吞噬細(xì)胞表面的FcγR,、FcμR結(jié)合,，增強其吞噬能力，通常將抗體促進吞噬細(xì)胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 （opsonization）,。 　?、诎l(fā)揮抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)
單克隆抗體：
　　（monoclonal antibody,，McAb）克隆選擇學(xué)說：淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體,，一種細(xì)胞帶一種受體，進入機體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個別淋巴細(xì)胞,，使之活化,，增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群，分泌同樣的抗體,。當(dāng)抗原進入體內(nèi),，在機體中就會誘導(dǎo)出針對不同抗原決定簇的多種抗體，如果要把這些抗體一一分開,，用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的,。1975年科勒（Kohler）和米爾斯坦（Milstein）將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合，培養(yǎng)出既能迅速生長無限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,。從而獲得針對某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體,。1995年，Katherine Knight博士在美國芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞（Plasmacytoma）,，開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù),。與鼠單抗相比，兔單抗具有：首先，兔抗血清通常含有高親和力抗體,，可以比鼠抗血清識別更多種類的表位,；其次，兔單克隆抗體能夠識別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原,；第三,，由于兔脾臟較大，可以更多進行的融合試驗,，使得高通量篩選融合成
生物活性：
　?。?）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞，通常需要補體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷,。然而,，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用,。 　
?。?）激活補體：IgM、IgG1,、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體,。
　?。?）結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞,，產(chǎn)生不同的疚,，參與免疫應(yīng)答。
　?。?）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中,，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜,，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素,。
　　（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì),，也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能,。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性,。
　?。?）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞,。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),，均能破壞抗體的作用,。抗體可被中性鹽類沉淀,。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化,。
　?。?）通過與細(xì)胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng) 　　①調(diào)理作用 　　IgG,、IgM的Fc段與吞噬細(xì)胞表面的FcγR,、FcμR結(jié)合，增強其吞噬能力,，通常將抗體促進吞噬細(xì)胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 （opsonization）,。 　?、诎l(fā)揮抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)
蛋白質(zhì)與多肽的：
多肽：通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,，它們的分子量低于10，000Da（Dalton,，道爾頓）,，能透過半透膜，不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀,。也有文獻把由2~10個氨基酸組成的肽稱為寡肽（小分子肽）,；10~50個氨基酸組成的肽稱為多肽；由50個以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì),。
蛋白質(zhì)：生物體中廣泛存在的一類生物大分子,，由核酸編碼的α氨基酸之間通過α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈，經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的,、有活性的大分子,。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈，再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物,。
就是：都是由20種基本氨基酸通過肽鍵連接而成的,。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別：
　　蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡寫為：C、H,、O,、N等元素→氨基酸→多肽（肽鏈）→蛋白質(zhì)。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個層次,，區(qū)別如下：
　?、俣嚯暮偷鞍踪|(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級結(jié)構(gòu)形式,，而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu),。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的,，一個蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成（如高等動物的細(xì)胞色素c是由104個氨基酸殘基的一條肽鏈組成），也可由多條肽鏈通過一定的化學(xué)鍵（肯定不是肽鍵,，如二硫鍵,、氫鍵等）連接而成（如胰島素由2條肽鏈組成、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成,、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成,、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等）。
　?、诙嚯呐c蛋白質(zhì)的功能有差異,。多肽往往是無生物活性，而蛋白質(zhì)是具有生物活性的,。多肽一般無活性（如蛋白質(zhì)在胃,、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽），少數(shù)有活性（如抗利尿激素就是多肽類激素）,，與蛋白質(zhì)相比,，多肽的分子量較小，沒有空間結(jié)構(gòu),，一般無活性,；蛋白質(zhì)的分子量較大，有空間結(jié)構(gòu),，有活性（變性后活性下降或消失,，活性消失叫做失活）
　　因此，一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實際上不能稱為蛋白質(zhì),。
多肽合成：
是一個重復(fù)添加氨基酸的過程,，固相合成順序一般從C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成。過去的多肽合成是在溶液中進行的稱為液相合成法,。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來,，經(jīng)過不斷的改進和完善，到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個常用技術(shù),，表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點,，從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。多肽合成總的來說分成兩種：固