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Anti-Phospho-cdc25C （Thr48） 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體

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單克隆抗體：
　　（monoclonal antibody,，McAb）克隆選擇學(xué)說：淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體,，一種細(xì)胞帶一種受體，進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個別淋巴細(xì)胞,，使之活化,，增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群，分泌同樣的抗體,。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi),，在機(jī)體中就會誘導(dǎo)出針對不同抗原決定簇的多種抗體，如果要把這些抗體一一分開,，用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的,。1975年科勒（Kohler）和米爾斯坦（Milstein）將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,，培養(yǎng)出既能迅速生長無限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,。從而獲得針對某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體。1995年,，Katherine Knight博士在美國芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞（Plasmacytoma）,，開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù)。與鼠單抗相比,，兔單抗具有：首先,，兔抗血清通常含有高親和力抗體，可以比鼠抗血清識別更多種類的表位；其次,，兔單克隆抗體能夠識別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原,；第三，由于兔脾臟較大,，可以更多進(jìn)行的融合試驗,，使得高通量篩選融合成
抗體規(guī)律：
　　（1）初次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)抗原*次進(jìn)入機(jī)體時,，需經(jīng)一定的潛伏期才能產(chǎn)生抗體,，且抗體產(chǎn)生的量也不多，在體內(nèi)維持的時間也較短,。
　?。?）再次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)相同抗原第二次進(jìn)入機(jī)體后，開始時,，由于原有抗體中的一部分與再次進(jìn)入的抗原結(jié)合,，可使原有抗體量略為降低。隨后,，抗體效價迅速大量增加,，可比初次反應(yīng)產(chǎn)生的多幾倍到幾十倍，在體內(nèi)留存的時間亦較長,。
　?。?）回憶反應(yīng)產(chǎn)生抗體：由抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體，經(jīng)過一定時間后可逐漸消失,。此時若再次接觸抗原,，可使已消失的抗體快速上升。如再次刺激機(jī)體的抗原與初次相同,，則稱為特異性回憶反應(yīng),；若與初次反應(yīng)不同，則稱為非特異性回憶反應(yīng),。非特異性回憶反應(yīng)引起的抗體的上升是暫時性的,，短時間內(nèi)即很快下降
抗體的效價鑒定：
不管是用于診斷還是用于治療，制備抗體的目的都是要求較高效價,。不同的抗原制備的抗體,，要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,，包括有試管凝集反應(yīng),、瓊脂擴(kuò)散試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗等,。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,，以資比較。如制備抗抗體的效價，一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗來鑒定,。抗體結(jié)構(gòu)：
　　抗體是具有4條多肽鏈的對稱結(jié)構(gòu),，其中2條較長、相對分子量較大的相同的重鏈（H鏈）,；2條較短,、相對分子量較小的相同的輕鏈（L鏈）。鏈間由二硫鍵和非共價鍵聯(lián)結(jié)形成一個由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子,。輕鏈有κ和λ兩種,，重鏈有μ、δ,、γ,、ε和α五種。 整個抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分,。在給定的物種中,，不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列?？勺儏^(qū)位于"Y"的兩臂末端,。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強(qiáng)烈，這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū),。高變區(qū)位于分子表面,，zui多由17個氨基酸殘基構(gòu)成，少則只有2 ～ 3個,。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性,。一個抗體分子上的兩個抗原結(jié)合部位是相同的，位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段（antigen-binding fragment, Fab）,。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段（crystalline fragment,FC）,，糖結(jié)合在FC
蛋白質(zhì)與多肽的：
多肽：通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽，它們的分子量低于10,，000Da（Dalton,，道爾頓），能透過半透膜,，不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀,。也有文獻(xiàn)把由2~10個氨基酸組成的肽稱為寡肽（小分子肽）；10~50個氨基酸組成的肽稱為多肽,；由50個以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì),。
蛋白質(zhì)：生物體中廣泛存在的一類生物大分子,，由核酸編碼的α氨基酸之間通過α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈,，經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的、有活性的大分子。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈,，再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物,。
就是：都是由20種基本氨基酸通過肽鍵連接而成的。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別：
　　蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡寫為：C,、H,、O、N等元素→氨基酸→多肽（肽鏈）→蛋白質(zhì),。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個層次,，區(qū)別如下：
　　①多肽和蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異,。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級結(jié)構(gòu)形式,，而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的,，一個蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成（如高等動物的細(xì)胞色素c是由104個氨基酸殘基的一條肽鏈組成）,，也可由多條肽鏈通過一定的化學(xué)鍵（肯定不是肽鍵，如二硫鍵,、氫鍵等）連接而成（如胰島素由2條肽鏈組成,、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成,、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等）,。
　　②多肽與蛋白質(zhì)的功能有差異,。多肽往往是無生物活性,，而蛋白質(zhì)是具有生物活性的。多肽一般無活性（如蛋白質(zhì)在胃,、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽）,，少數(shù)有活性（如抗利尿激素就是多肽類激素），與蛋白質(zhì)相比,，多肽的分子量較小,，沒有空間結(jié)構(gòu)，一般無活性,；蛋白質(zhì)的分子量較大,，有空間結(jié)構(gòu)，有活性（變性后活性下降或消失,，活性消失叫做失活）
　　因此,，一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實際上不能稱為蛋白質(zhì)。
多肽合成：
是一個重復(fù)添加氨基酸的過程,，固相合成順序一般從C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成,。過去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法,。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來，經(jīng)過不斷的改進(jìn)和完善,，到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個常用技術(shù),，表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點，從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度,。多肽合成總的來說分成兩種：固