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Anti-APPL1 APPL1抗體

一抗

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蛋白質(zhì)與多肽的：
多肽：通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,，它們的分子量低于10,，000Da（Dalton,，道爾頓），能透過(guò)半透膜,，不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀,。也有文獻(xiàn)把由2~10個(gè)氨基酸組成的肽稱(chēng)為寡肽（小分子肽）；10~50個(gè)氨基酸組成的肽稱(chēng)為多肽,；由50個(gè)以上的氨基酸組成的肽就稱(chēng)為蛋白質(zhì),。
蛋白質(zhì)：生物體中廣泛存在的一類(lèi)生物大分子，由核酸編碼的α氨基酸之間通過(guò)α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈,，經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的,、有活性的大分子。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈,，再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物,。
就是：都是由20種基本氨基酸通過(guò)肽鍵連接而成的。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別：
　　蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡(jiǎn)寫(xiě)為：C,、H,、O、N等元素→氨基酸→多肽（肽鏈）→蛋白質(zhì),。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個(gè)層次,，區(qū)別如下：
　　①多肽和蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異,。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級(jí)結(jié)構(gòu)形式,，而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的,，一個(gè)蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成（如高等動(dòng)物的細(xì)胞色素c是由104個(gè)氨基酸殘基的一條肽鏈組成）,，也可由多條肽鏈通過(guò)一定的化學(xué)鍵（肯定不是肽鍵，如二硫鍵,、氫鍵等）連接而成（如胰島素由2條肽鏈組成,、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成,、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等）,。
　?、诙嚯呐c蛋白質(zhì)的功能有差異,。多肽往往是無(wú)生物活性，而蛋白質(zhì)是具有生物活性的,。多肽一般無(wú)活性（如蛋白質(zhì)在胃,、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽），少數(shù)有活性（如抗利尿激素就是多肽類(lèi)激素）,，與蛋白質(zhì)相比,，多肽的分子量較小,，沒(méi)有空間結(jié)構(gòu)，一般無(wú)活性,；蛋白質(zhì)的分子量較大,，有空間結(jié)構(gòu)，有活性（變性后活性下降或消失,，活性消失叫做失活）
　　因此,，一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實(shí)際上不能稱(chēng)為蛋白質(zhì)。
多肽合成：
是一個(gè)重復(fù)添加氨基酸的過(guò)程,，固相合成順序一般從C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成,。過(guò)去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱(chēng)為液相合成法。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來(lái),，經(jīng)過(guò)不斷的改進(jìn)和完善,，到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個(gè)常用技術(shù)，表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點(diǎn),，從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度,。多肽合成總的來(lái)說(shuō)分成兩種：固
抗體的效價(jià)鑒定：
不管是用于診斷還是用于治療,，制備抗體的目的都是要求較高效價(jià),。不同的抗原制備的抗體，要求的效價(jià)不一,。鑒定效價(jià)的方法很多,，包括有試管凝集反應(yīng)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等,。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法，以資比較,。如制備抗抗體的效價(jià),，一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定,。抗體規(guī)律：
　?。?）初次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)抗原*次進(jìn)入機(jī)體時(shí),，需經(jīng)一定的潛伏期才能產(chǎn)生抗體，且抗體產(chǎn)生的量也不多,，在體內(nèi)維持的時(shí)間也較短。
　?。?）再次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)相同抗原第二次進(jìn)入機(jī)體后,，開(kāi)始時(shí)，由于原有抗體中的一部分與再次進(jìn)入的抗原結(jié)合,，可使原有抗體量略為降低,。隨后，抗體效價(jià)迅速大量增加,，可比初次反應(yīng)產(chǎn)生的多幾倍到幾十倍，在體內(nèi)留存的時(shí)間亦較長(zhǎng),。
　?。?）回憶反應(yīng)產(chǎn)生抗體：由抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后可逐漸消失,。此時(shí)若再次接觸抗原,，可使已消失的抗體快速上升。如再次刺激機(jī)體的抗原與初次相同,，則稱(chēng)為特異性回憶反應(yīng),；若與初次反應(yīng)不同，則稱(chēng)為非特異性回憶反應(yīng),。非特異性回憶反應(yīng)引起的抗體的上升是暫時(shí)性的,，短時(shí)間內(nèi)即很快下降
按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能分類(lèi)：
　　按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能，可將其分為IgM,、IgG,、IgA、IgE,、IgD五類(lèi),。
　　IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的抗體。它們?cè)谂c抗原結(jié)合后啟動(dòng)補(bǔ)體的級(jí)聯(lián)反應(yīng),。它們還把入侵者相互連接起來(lái),，聚成一堆便于巨噬細(xì)胞的吞噬；
　 IgG抗體激活補(bǔ)體,，中和多種毒素,。IgG持續(xù)的時(shí)間長(zhǎng)，是*能在母親妊娠期穿過(guò)胎盤(pán)保護(hù)胎兒的抗體,。他們還從乳腺分泌進(jìn)入初乳,，使新生兒得到保護(hù)；
　　IgA抗體進(jìn)入身體的黏膜表面,，包括呼吸,、消化、生殖等管道的黏膜,，中和感染因子,。還可以通過(guò)母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中，是在母乳中含量zui多,，zui為重要的一類(lèi)抗體,；
　　IgE抗體的尾部與嗜堿細(xì)胞、肥大細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)合,。當(dāng)抗體與抗原結(jié)合后,，嗜堿細(xì)胞與肥大細(xì)胞釋放組織胺一類(lèi)物質(zhì)促進(jìn)炎癥的發(fā)展。這也是引發(fā)速發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)的抗體,；
　　IgD抗體的作用還不太清楚,。它們主要出現(xiàn)在成熟的B淋巴細(xì)胞表面上，可能與B細(xì)胞的分化有關(guān),。
（IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發(fā)現(xiàn),，分子量為175kD，主要由扁桃體,、脾等處漿細(xì)胞產(chǎn)生,，人血清中IgD濃度為3～40μg/ml,不到血清總Ig的1%，在個(gè)體發(fā)育中合成較晚,。IgD鉸鏈區(qū)很長(zhǎng),，且對(duì)蛋白酶水解敏感，因此IgD半衰期很短,，僅2.8天,。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚。在B細(xì)胞分化到成熟B細(xì)胞階段,，除了表達(dá)SmIgD,，抗原刺激后表現(xiàn)為免疫耐受。成熟B細(xì)胞活化后或者活化后或者變成記憶B細(xì)胞時(shí),，SmIgD逐br/>單克隆抗體：
　?。╩onoclonal antibody，McAb）克隆選擇學(xué)說(shuō)：淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專(zhuān)一性結(jié)合的受體,，一種細(xì)胞帶一種受體,，進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個(gè)別淋巴細(xì)胞，使之活化,，增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群,，分泌同樣的抗體。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi),，在機(jī)體中就會(huì)誘導(dǎo)出針對(duì)不同抗原決定簇的多種抗體,，如果要把這些抗體一一分開(kāi)，用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的。1975年科勒（Kohler）和米爾斯坦（Milstein）將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,，培養(yǎng)出既能迅速生長(zhǎng)無(wú)限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,。從而獲得針對(duì)某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體。1995年,，Katherine Knight博士在美國(guó)芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞（Plasmacytoma）,，開(kāi)創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù)。與鼠單抗相比,，兔單抗具有：首先,，兔抗血清通常含有高親和力抗體，可以比鼠抗血清識(shí)別更多種類(lèi)的表位,；其次,，兔單克隆抗體能夠識(shí)別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原；第三,，由于兔脾臟較大,，可以更多進(jìn)行的融合試驗(yàn)，使得高通量篩選融合成