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rec Protein A/FITC 熒光素標(biāo)記重組純化蛋白A

熒光素標(biāo)記二抗

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抗體的特異性鑒定 ：
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?？贵w的特異性高,，它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示,。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定,。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線，計算各自的結(jié)合率,，求出各自在 IC50時的濃度,，并按下列公式計算交叉反應(yīng)率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,，而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,，表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,，即該血清的特異性較好。
抗體結(jié)構(gòu)：
　　抗體是具有4條多肽鏈的對稱結(jié)構(gòu),，其中2條較長,、相對分子量較大的相同的重鏈（H鏈）；2條較短,、相對分子量較小的相同的輕鏈（L鏈）,。鏈間由二硫鍵和非共價鍵聯(lián)結(jié)形成一個由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子。輕鏈有κ和λ兩種,，重鏈有μ,、δ、γ,、ε和α五種,。 整個抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在給定的物種中,，不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列,。可變區(qū)位于"Y"的兩臂末端,。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強(qiáng)烈,，這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū)。高變區(qū)位于分子表面,，zui多由17個氨基酸殘基構(gòu)成,，少則只有2 ～ 3個。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性,。一個抗體分子上的兩個抗原結(jié)合部位是相同的,，位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段（antigen-binding fragment, Fab）。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段（crystalline fragment,FC）,，糖結(jié)合在FC 上,。
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟：
　　1、制備抗原,。 　
　2,、選擇實(shí)驗(yàn)動物。
　　3,、動物免疫,。 　
　4、試取血進(jìn)行測試,，看看是否成功免疫,。
　　5、如果成功免疫，殺死實(shí)驗(yàn)動物,，采集全部血清,。
　　6、純化出抗體,。 　
　7,、鑒定抗體。包括純度以及特異性,。
　　 zui初有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分,，故曾把抗體統(tǒng)稱為丙種（γ）球蛋白。后來發(fā)現(xiàn),，抗體并不都在γ區(qū),；并且位于γ區(qū)的球蛋白，也不一定都具有抗體活性,。
　　 1964年，世界衛(wèi)生組織舉行專門會議,，將具有抗體活性以及與抗體相關(guān)的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白（Ig）,，如骨髓瘤蛋白，巨球蛋白血癥,、冷球蛋白血癥等患者血清中存在的異常免疫球蛋白以及正常人天然存在的免疫球蛋白亞單位等,。因而免疫球蛋白是結(jié)構(gòu)化學(xué)的概念，而抗體是生物學(xué)功能的概念,?？梢哉f，幾乎所有抗體都是免疫球蛋白（極少數(shù)抗體為RNA）,，但并非所有免疫球蛋白都是抗體,。
zui初有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分，故曾把抗體統(tǒng)稱為丙種（γ）球蛋白,。后來發(fā)現(xiàn),，抗體并不都在γ區(qū)；并且位于γ區(qū)的球蛋白,，也不一定都具有抗體活性,。
　　 1964年，世界衛(wèi)生組織舉行專門會議,，將具有抗體活性以及與抗體相關(guān)的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白（Ig）,，如骨髓瘤蛋白，巨球蛋白血癥,、冷球蛋白血癥等患者血清中存在的異常免疫球蛋白以及正常人天然存在的免疫球蛋白亞單位等,。因而免疫球蛋白是結(jié)構(gòu)化學(xué)的概念，而抗體是生物學(xué)功能的概念?？梢哉f,，幾乎所有抗體都是免疫球蛋白（極少數(shù)抗體為RNA），但并非所有免疫球蛋白都是抗體,。