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Rabbit Anti- guinea pig IgG/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗豚鼠IgG
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單克隆抗體:
  (monoclonal antibody,,McAb)克隆選擇學(xué)說(shuō):淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體,,一種細(xì)胞帶一種受體,進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個(gè)別淋巴細(xì)胞,,使之活化,,增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群,分泌同樣的抗體,。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi),,在機(jī)體中就會(huì)誘導(dǎo)出針對(duì)不同抗原決定簇的多種抗體,如果要把這些抗體一一分開(kāi),,用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的,。1975年科勒(Kohler)和米爾斯坦(Milstein)將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,培養(yǎng)出既能迅速生長(zhǎng)無(wú)限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,。從而獲得針對(duì)某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體,。1995年,Katherine Knight博士在美國(guó)芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞(Plasmacytoma),,開(kāi)創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù),。與鼠單抗相比,兔單抗具有:首先,,兔抗血清通常含有高親和力抗體,,可以比鼠抗血清識(shí)別更多種類的表位;其次,,兔單克隆抗體能夠識(shí)別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原,;第三,由于兔脾臟較大,,可以更多進(jìn)行的融合試驗(yàn),使得高通量篩選融合成為可能,。
抗體的效價(jià)鑒定:
不管是用于診斷還是用于治療,,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,,要求的效價(jià)不一,。鑒定效價(jià)的方法很多,,包括有試管凝集反應(yīng)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等,。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較,。如制備抗抗體的效價(jià),,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
抗體的特異性鑒定 :
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力,??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng),。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示,。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,,計(jì)算各自的結(jié)合率,,求出各自在 IC50時(shí)的濃度,并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率,。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,,即該血清的特異性較好,。
生物活性:
  (1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷,。然而,抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合,,直接發(fā)揮中和病毒的作用,。  
 (2)激活補(bǔ)體:IgM,、IgG1,、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA,、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體,。
  (3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答,。
 ?。?)可通過(guò)胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,,使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素,。
  (5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),,也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能,。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性,。
 ?。?)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞,。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀,。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,,再經(jīng)透析法將其純化,。
  (7)通過(guò)與細(xì)胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng)  ?、僬{(diào)理作用   IgG,、IgM的Fc段與吞噬細(xì)胞表面的FcγR、FcμR結(jié)合,,增強(qiáng)其吞噬能力,,通常將抗體促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 (opsonization)。  ?、诎l(fā)揮抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用,。
zui初有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分,故曾把抗體統(tǒng)稱為丙種(γ)球蛋白,。后來(lái)發(fā)現(xiàn),,抗體并不都在γ區(qū);并且位于γ區(qū)的球蛋白,,也不一定都具有抗體活性,。
   1964年,世界衛(wèi)生組織舉行專門會(huì)議,,將具有抗體活性以及與抗體相關(guān)的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白(Ig),,如骨髓瘤蛋白,巨球蛋白血癥,、冷球蛋白血癥等患者血清中存在的異常免疫球蛋白以及正常人天然存在的免疫球蛋白亞單位等,。因而免疫球蛋白是結(jié)構(gòu)化學(xué)的概念,而抗體是生物學(xué)功能的概念,??梢哉f(shuō),幾乎所有抗體都是免疫球蛋白(極少數(shù)抗體為RNA),,但并非所有免疫球蛋白都是抗體,。


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