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Rabbit Anti-bovine IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗牛IgG

酶標記二抗

0.1ml

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多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟：
　　1,、制備抗原,。 　
　2、選擇實驗動物,。
　　3,、動物免疫。 　
　4、試取血進行測試,，看看是否成功免疫,。
　　5、如果成功免疫,，殺死實驗動物,，采集全部血清。
　　6,、純化出抗體,。 　
　7,、鑒定抗體,。包括純度以及特異性。
　　抗體結(jié)構(gòu)：
　　抗體是具有4條多肽鏈的對稱結(jié)構(gòu),，其中2條較長,、相對分子量較大的相同的重鏈（H鏈）；2條較短,、相對分子量較小的相同的輕鏈（L鏈）,。鏈間由二硫鍵和非共價鍵聯(lián)結(jié)形成一個由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子。輕鏈有κ和λ兩種,，重鏈有μ,、δ、γ,、ε和α五種,。 整個抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在給定的物種中,，不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列,。可變區(qū)位于"Y"的兩臂末端,。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強烈,，這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū)。高變區(qū)位于分子表面,，zui多由17個氨基酸殘基構(gòu)成,，少則只有2 ～ 3個。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性,。一個抗體分子上的兩個抗原結(jié)合部位是相同的,，位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段（antigen-binding fragment, Fab）。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段（crystalline fragment,FC）,，糖結(jié)合在FC 上,。
生物活性：
　　（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷,。然而,，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用,。 　
?。?）激活補體：IgM、IgG1,、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體,。
　?。?）結(jié)合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細胞,，產(chǎn)生不同的疚,，參與免疫應(yīng)答。
　?。?）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中,，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜,，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素,。
　　（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì),，也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能,。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性,。
　?。?）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞,。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀,。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,，再經(jīng)透析法將其純化,。
　　（7）通過與細胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng) 　?、僬{(diào)理作用 　　IgG,、IgM的Fc段與吞噬細胞表面的FcγR、FcμR結(jié)合，增強其吞噬能力,，通常將抗體促進吞噬細胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 （opsonization）,。 　　②發(fā)揮抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用,。
單克隆抗體和多克隆抗體有什么區(qū)別?
抗原上那部分可以引起機體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),，叫做抗原決定簇。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,，因而使機體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,，zui終產(chǎn)生出抗體是漿細胞。只針對一個抗原決定簇起作用的漿細胞群就是一個純系,，純系的英文為Clone,，音譯就是克隆。
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體,。單克隆抗體能目標明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,，就象導彈精確地命中目標一樣,。另一方面,，即使是同一個抗原決定簇，在機體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,，形成好幾種單克隆抗體混雜物,，稱為多克隆抗體。
抗體的親和力 ：
是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度,。親和力的高低是由抗原分子的大小,、抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,、疏水鍵,、側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力、范德華力和空間斥力,。親和力常以親和常數(shù)K表示,，K的單位是L/mol，通常K的范圍在 108 ～1010 /mol,，也有多達 1014 /mol,。抗體親和力的測定對抗體的篩選,，確定抗體的用途,，驗證抗體的均一性等均有重要意義。