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Rabbit Anti-bovine IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗牛IgG

酶標(biāo)記二抗

0.1ml

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多克隆抗體的制備一般包括以下幾個(gè)步驟：
　　1,、制備抗原。 　
　2,、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,。
　　3、動(dòng)物免疫,。 　
　4,、試取血進(jìn)行測試，看看是否成功免疫,。
　　5、如果成功免疫,，殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,，采集全部血清。
　　6,、純化出抗體,。 　
　7、鑒定抗體,。包括純度以及特異性,。
　　抗體結(jié)構(gòu)：
　　抗體是具有4條多肽鏈的對稱結(jié)構(gòu)，其中2條較長,、相對分子量較大的相同的重鏈（H鏈）,；2條較短、相對分子量較小的相同的輕鏈（L鏈）,。鏈間由二硫鍵和非共價(jià)鍵聯(lián)結(jié)形成一個(gè)由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子,。輕鏈有κ和λ兩種，重鏈有μ、δ,、γ,、ε和α五種。 整個(gè)抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分,。在給定的物種中,，不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列?？勺儏^(qū)位于"Y"的兩臂末端,。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強(qiáng)烈，這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū),。高變區(qū)位于分子表面,，zui多由17個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，少則只有2 ～ 3個(gè),。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性,。一個(gè)抗體分子上的兩個(gè)抗原結(jié)合部位是相同的，位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段（antigen-binding fragment, Fab）,。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段（crystalline fragment,FC）,，糖結(jié)合在FC 上。
生物活性：
　?。?）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,，通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 　
?。?）激活補(bǔ)體：IgM,、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,，凝聚的IgA,、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
　?。?）結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白,，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚,，參與免疫應(yīng)答,。
　　（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫,。免疫球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜,，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
　?。?）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì),，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,，各具有不同的抗原性,。
　　（6）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱,，60～70℃即被破壞,。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用,?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,，再經(jīng)透析法將其純化。
　?。?）通過與細(xì)胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng) 　?、僬{(diào)理作用 　　IgG、IgM的Fc段與吞噬細(xì)胞表面的FcγR,、FcμR結(jié)合,，增強(qiáng)其吞噬能力，通常將抗體促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 （opsonization）,。 　?、诎l(fā)揮抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。
單克隆抗體和多克隆抗體有什么區(qū)別?
抗原上那部分可以引起機(jī)體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),，叫做抗原決定簇,。一個(gè)抗原上可以有好幾個(gè)不同的抗原決定簇，因而使機(jī)體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,，zui終產(chǎn)生出抗體是漿細(xì)胞,。只針對一個(gè)抗原決定簇起作用的漿細(xì)胞群就是一個(gè)純系,，純系的英文為Clone,，音譯就是克隆。
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體,。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,，就象導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面,，即使是同一個(gè)抗原決定簇,，在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體,。
抗體的親和力 ：
是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度,。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的,。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,、范德華力和空間斥力,。親和力常以親和常數(shù)K表示，K的單位是L/mol,，通常K的范圍在 108 ～1010 /mol,，也有多達(dá) 1014 /mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選,，確定抗體的用途，驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義,。