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Anti-ADFP 脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體

一抗

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抗體的效價(jià)鑒定：
不管是用于診斷還是用于治療，制備抗體的目的都是要求較高效價(jià),。不同的抗原制備的抗體,，要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,，包括有試管凝集反應(yīng),、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等,。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,，以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),，一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定,。蛋白質(zhì)與多肽的：
多肽：通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽，它們的分子量低于10，000Da（Dalton,，道爾頓）,，能透過半透膜，不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀,。也有文獻(xiàn)把由2~10個(gè)氨基酸組成的肽稱為寡肽（小分子肽）,；10~50個(gè)氨基酸組成的肽稱為多肽；由50個(gè)以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì),。
蛋白質(zhì)：生物體中廣泛存在的一類生物大分子,，由核酸編碼的α氨基酸之間通過α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈，經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的,、有活性的大分子,。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈，再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物,。
就是：都是由20種基本氨基酸通過肽鍵連接而成的,。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別：
　　蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡(jiǎn)寫為：C、H,、O,、N等元素→氨基酸→多肽（肽鏈）→蛋白質(zhì)。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個(gè)層次,，區(qū)別如下：
　?、俣嚯暮偷鞍踪|(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級(jí)結(jié)構(gòu)形式,，而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu),。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的，一個(gè)蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成（如高等動(dòng)物的細(xì)胞色素c是由104個(gè)氨基酸殘基的一條肽鏈組成）,，也可由多條肽鏈通過一定的化學(xué)鍵（肯定不是肽鍵,，如二硫鍵、氫鍵等）連接而成（如胰島素由2條肽鏈組成,、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成,、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等）,。
　?、诙嚯呐c蛋白質(zhì)的功能有差異。多肽往往是無生物活性,，而蛋白質(zhì)是具有生物活性的,。多肽一般無活性（如蛋白質(zhì)在胃、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽）,，少數(shù)有活性（如抗利尿激素就是多肽類激素）,，與蛋白質(zhì)相比,，多肽的分子量較小，沒有空間結(jié)構(gòu),，一般無活性,；蛋白質(zhì)的分子量較大，有空間結(jié)構(gòu),，有活性（變性后活性下降或消失,，活性消失叫做失活）
　　因此，一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實(shí)際上不能稱為蛋白質(zhì),。
多肽合成：
是一個(gè)重復(fù)添加氨基酸的過程,，固相合成順序一般從C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成。過去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法,。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來,，經(jīng)過不斷的改進(jìn)和完善，到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個(gè)常用技術(shù),，表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點(diǎn),，從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。多肽合成總的來說分成兩種：固
抗體結(jié)構(gòu)：
　　抗體是具有4條多肽鏈的對(duì)稱結(jié)構(gòu),，其中2條較長(zhǎng),、相對(duì)分子量較大的相同的重鏈（H鏈）,；2條較短,、相對(duì)分子量較小的相同的輕鏈（L鏈）。鏈間由二硫鍵和非共價(jià)鍵聯(lián)結(jié)形成一個(gè)由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子,。輕鏈有κ和λ兩種,，重鏈有μ、δ,、γ,、ε和α五種。 整個(gè)抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分,。在給定的物種中,，不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列?？勺儏^(qū)位于"Y"的兩臂末端,。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強(qiáng)烈，這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū),。高變區(qū)位于分子表面,，zui多由17個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，少則只有2 ～ 3個(gè),。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性,。一個(gè)抗體分子上的兩個(gè)抗原結(jié)合部位是相同的，位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段（antigen-binding fragment, Fab）。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段（crystalline fragment,FC）,，糖結(jié)合在FC
抗體結(jié)構(gòu)：
　　抗體是具有4條多肽鏈的對(duì)稱結(jié)構(gòu),，其中2條較長(zhǎng)、相對(duì)分子量較大的相同的重鏈（H鏈）,；2條較短,、相對(duì)分子量較小的相同的輕鏈（L鏈）。鏈間由二硫鍵和非共價(jià)鍵聯(lián)結(jié)形成一個(gè)由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子,。輕鏈有κ和λ兩種,，重鏈有μ、δ,、γ,、ε和α五種。 整個(gè)抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分,。在給定的物種中,，不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列?？勺儏^(qū)位于"Y"的兩臂末端,。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強(qiáng)烈，這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū),。高變區(qū)位于分子表面,，zui多由17個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，少則只有2 ～ 3個(gè),。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性,。一個(gè)抗體分子上的兩個(gè)抗原結(jié)合部位是相同的，位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段（antigen-binding fragment, Fab）,。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段（crystalline fragment,FC）,，糖結(jié)合在FC
抗體的親和力 ：
是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的,。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵、疏水鍵,、側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,，K的單位是L/mol,，通常K的范圍在 108 ～1010 /mol，也有多達(dá) 1014 /mol,?？贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,，確定抗體的用途，驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義,。<