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Anti-Adducin protein 內(nèi)收蛋白抗體

一抗

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抗體的親和力 ：
是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度,。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的,。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,、范德華力和空間斥力,。親和力常以親和常數(shù)K表示，K的單位是L/mol,，通常K的范圍在 108 ～1010 /mol,，也有多達(dá) 1014 /mol?？贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,，確定抗體的用途，驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義,。<
蛋白質(zhì)與多肽的：
多肽：通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,，它們的分子量低于10，000Da（Dalton,，道爾頓）,，能透過半透膜，不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀,。也有文獻(xiàn)把由2~10個(gè)氨基酸組成的肽稱為寡肽（小分子肽）,；10~50個(gè)氨基酸組成的肽稱為多肽；由50個(gè)以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì),。
蛋白質(zhì)：生物體中廣泛存在的一類生物大分子,，由核酸編碼的α氨基酸之間通過α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈，經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的,、有活性的大分子,。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈，再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物,。
就是：都是由20種基本氨基酸通過肽鍵連接而成的,。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別：
　　蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡(jiǎn)寫為：C、H、O,、N等元素→氨基酸→多肽（肽鏈）→蛋白質(zhì),。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個(gè)層次，區(qū)別如下：
　?、俣嚯暮偷鞍踪|(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異,。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級(jí)結(jié)構(gòu)形式，而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu),。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的,，一個(gè)蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成（如高等動(dòng)物的細(xì)胞色素c是由104個(gè)氨基酸殘基的一條肽鏈組成），也可由多條肽鏈通過一定的化學(xué)鍵（肯定不是肽鍵,，如二硫鍵,、氫鍵等）連接而成（如胰島素由2條肽鏈組成、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成,、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成,、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等）。
　?、诙嚯呐c蛋白質(zhì)的功能有差異,。多肽往往是無(wú)生物活性，而蛋白質(zhì)是具有生物活性的,。多肽一般無(wú)活性（如蛋白質(zhì)在胃,、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽），少數(shù)有活性（如抗利尿激素就是多肽類激素）,，與蛋白質(zhì)相比,，多肽的分子量較小，沒有空間結(jié)構(gòu),，一般無(wú)活性,；蛋白質(zhì)的分子量較大，有空間結(jié)構(gòu),，有活性（變性后活性下降或消失,，活性消失叫做失活）
　　因此，一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實(shí)際上不能稱為蛋白質(zhì),。
多肽合成：
是一個(gè)重復(fù)添加氨基酸的過程,，固相合成順序一般從C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成。過去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法,。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來(lái),，經(jīng)過不斷的改進(jìn)和完善，到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個(gè)常用技術(shù),，表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點(diǎn),，從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度,。多肽合成總的來(lái)說(shuō)分成兩種：固
抗體結(jié)構(gòu)：
　　抗體是具有4條多肽鏈的對(duì)稱結(jié)構(gòu)，其中2條較長(zhǎng),、相對(duì)分子量較大的相同的重鏈（H鏈）,；2條較短、相對(duì)分子量較小的相同的輕鏈（L鏈）,。鏈間由二硫鍵和非共價(jià)鍵聯(lián)結(jié)形成一個(gè)由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子,。輕鏈有κ和λ兩種，重鏈有μ,、δ,、γ、ε和α五種,。 整個(gè)抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分,。在給定的物種中,，不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列,。可變區(qū)位于"Y"的兩臂末端,。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強(qiáng)烈,，這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū)。高變區(qū)位于分子表面,，zui多由17個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成,，少則只有2 ～ 3個(gè)。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性,。一個(gè)抗體分子上的兩個(gè)抗原結(jié)合部位是相同的,，位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段（antigen-binding fragment, Fab）。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段（crystalline fragment,FC）,，糖結(jié)合在FC
抗體的親和力 ：
是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度,。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的,。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,、范德華力和空間斥力,。親和力常以親和常數(shù)K表示，K的單位是L/mol,，通常K的范圍在 108 ～1010 /mol,，也有多達(dá) 1014 /mol?？贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,，確定抗體的用途,，驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。<
單克隆抗體：
　?。╩onoclonal antibody,，McAb）克隆選擇學(xué)說(shuō)：淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體，一種細(xì)胞帶一種受體,，進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個(gè)別淋巴細(xì)胞,，使之活化，增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群,，分泌同樣的抗體,。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi)，在機(jī)體中就會(huì)誘導(dǎo)出針對(duì)不同抗原決定簇的多種抗體,，如果要把這些抗體一一分開,，用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的。1975年科勒（Kohler）和米爾斯坦（Milstein）將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,，培養(yǎng)出既能迅速生長(zhǎng)無(wú)限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,。從而獲得針對(duì)某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體。1995年,，Katherine Knight博士在美國(guó)芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞（Plasmacytoma）,，開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù)。與鼠單抗相比,，兔單抗具有：首先,，兔抗血清通常含有高親和力抗體，可以比鼠抗血清識(shí)別更多種類的表位,；其次,，兔單克隆抗體能夠識(shí)別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原；第三,，由于兔脾臟較大,，可以更多進(jìn)行的融合試驗(yàn)，使得高通量篩選融合成