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相關(guān)知識(shí)>>>>>

抗體的親和力 :
是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的,。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵、疏水鍵,、側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,,K的單位是L/mol,,通常K的范圍在 108 ~1010 /mol,也有多達(dá) 1014 /mol,??贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義,。<
生物活性:
  (1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷,。然而,,抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用,。  
?。?)激活補(bǔ)體:IgM、IgG1,、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體,。
 ?。?)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,,產(chǎn)生不同的疚,,參與免疫應(yīng)答。
 ?。?)可通過(guò)胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,,使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
 ?。?)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),,也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,,各具有不同的抗原性,。
  (6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,,60~70℃即被破壞,。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用,??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,,再經(jīng)透析法將其純化。
 ?。?)通過(guò)與細(xì)胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng)  ?、僬{(diào)理作用   IgG、IgM的Fc段與吞噬細(xì)胞表面的FcγR,、FcμR結(jié)合,,增強(qiáng)其吞噬能力,,通常將抗體促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 (opsonization)。  ?、诎l(fā)揮抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)
單克隆抗體和多克隆抗體有什么區(qū)別?
抗原上那部分可以引起機(jī)體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),,叫做抗原決定簇。一個(gè)抗原上可以有好幾個(gè)不同的抗原決定簇,,因而使機(jī)體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,,zui終產(chǎn)生出抗體是漿細(xì)胞。只針對(duì)一個(gè)抗原決定簇起作用的漿細(xì)胞群就是一個(gè)純系,,純系的英文為Clone,,音譯就是克隆。
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體,。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,,就象導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面,,即使是同一個(gè)抗原決定簇,,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來(lái)產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,,稱為多克隆抗體,。<
按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能分類:
  按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能,可將其分為IgM,、IgG,、IgA、IgE,、IgD五類,。
  IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的抗體。它們?cè)谂c抗原結(jié)合后啟動(dòng)補(bǔ)體的級(jí)聯(lián)反應(yīng),。它們還把入侵者相互連接起來(lái),,聚成一堆便于巨噬細(xì)胞的吞噬;
  IgG抗體激活補(bǔ)體,,中和多種毒素,。IgG持續(xù)的時(shí)間長(zhǎng),是*能在母親妊娠期穿過(guò)胎盤保護(hù)胎兒的抗體,。他們還從乳腺分泌進(jìn)入初乳,,使新生兒得到保護(hù);
  IgA抗體進(jìn)入身體的黏膜表面,,包括呼吸,、消化、生殖等管道的黏膜,,中和感染因子,。還可以通過(guò)母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中,,是在母乳中含量zui多,zui為重要的一類抗體,;
  IgE抗體的尾部與嗜堿細(xì)胞,、肥大細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)合。當(dāng)抗體與抗原結(jié)合后,,嗜堿細(xì)胞與肥大細(xì)胞釋放組織胺一類物質(zhì)促進(jìn)炎癥的發(fā)展,。這也是引發(fā)速發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)的抗體;
  IgD抗體的作用還不太清楚,。它們主要出現(xiàn)在成熟的B淋巴細(xì)胞表面上,,可能與B細(xì)胞的分化有關(guān)。
(IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發(fā)現(xiàn),,分子量為175kD,,主要由扁桃體、脾等處漿細(xì)胞產(chǎn)生,,人血清中IgD濃度為3~40μg/ml,不到血清總Ig的1%,,在個(gè)體發(fā)育中合成較晚。IgD鉸鏈區(qū)很長(zhǎng),,且對(duì)蛋白酶水解敏感,,因此IgD半衰期很短,僅2.8天,。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚,。在B細(xì)胞分化到成熟B細(xì)胞階段,除了表達(dá)SmIgD,,抗原刺激后表現(xiàn)為免疫耐受,。成熟B細(xì)胞活化后或者活化后或者變成記憶B細(xì)胞時(shí),,SmIgD逐br/>蛋白質(zhì)與多肽的:
多肽:通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,,它們的分子量低于10,000Da(Dalton,,道爾頓),,能透過(guò)半透膜,不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀,。也有文獻(xiàn)把由2~10個(gè)氨基酸組成的肽稱為寡肽(小分子肽),;10~50個(gè)氨基酸組成的肽稱為多肽;由50個(gè)以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì),。
蛋白質(zhì):生物體中廣泛存在的一類生物大分子,,由核酸編碼的α氨基酸之間通過(guò)α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈,經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的,、有活性的大分子,。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈,,再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物。
就是:都是由20種基本氨基酸通過(guò)肽鍵連接而成的,。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別:
  蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡(jiǎn)寫為:C,、H、O,、N等元素→氨基酸→多肽(肽鏈)→蛋白質(zhì),。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個(gè)層次,區(qū)別如下:
 ?、俣嚯暮偷鞍踪|(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異,。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級(jí)結(jié)構(gòu)形式,而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu),。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的,,一個(gè)蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成(如高等動(dòng)物的細(xì)胞色素c是由104個(gè)氨基酸殘基的一條肽鏈組成),也可由多條肽鏈通過(guò)一定的化學(xué)鍵(肯定不是肽鍵,,如二硫鍵,、氫鍵等)連接而成(如胰島素由2條肽鏈組成、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成,、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成,、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等)。
 ?、诙嚯呐c蛋白質(zhì)的功能有差異,。多肽往往是無(wú)生物活性,而蛋白質(zhì)是具有生物活性的,。多肽一般無(wú)活性(如蛋白質(zhì)在胃,、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽),少數(shù)有活性(如抗利尿激素就是多肽類激素),,與蛋白質(zhì)相比,,多肽的分子量較小,沒(méi)有空間結(jié)構(gòu),,一般無(wú)活性,;蛋白質(zhì)的分子量較大,有空間結(jié)構(gòu),,有活性(變性后活性下降或消失,,活性消失叫做失活)
  因此,一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實(shí)際上不能稱為蛋白質(zhì),。
多肽合成:
是一個(gè)重復(fù)添加氨基酸的過(guò)程,,固相合成順序一般從C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。過(guò)去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法,。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來(lái),,經(jīng)過(guò)不斷的改進(jìn)和完善,,到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個(gè)常用技術(shù),表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點(diǎn),,從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度,。多肽合成總的來(lái)說(shuō)分成兩種:固


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