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Anti-phospho-14-3-3 （Ser58） 磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗體

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相關(guān)知識(shí)>>>>>

抗體的特異性鑒定 ：
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力,。抗體的特異性高,，它的識(shí)別能力就強(qiáng),。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定,。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,，計(jì)算各自的結(jié)合率，求出各自在 IC50時(shí)的濃度,，并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率,。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,，而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí)，表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,，即該血清的特異性較好,。<
抗體的親和力 ：
是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的,。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵、疏水鍵,、側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,，K的單位是L/mol,，通常K的范圍在 108 ～1010 /mol，也有多達(dá) 1014 /mol,?？贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選，確定抗體的用途,，驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義,。<
單克隆抗體：
　　（monoclonal antibody,，McAb）克隆選擇學(xué)說(shuō)：淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專(zhuān)一性結(jié)合的受體,，一種細(xì)胞帶一種受體，進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個(gè)別淋巴細(xì)胞,，使之活化,，增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群，分泌同樣的抗體,。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi),，在機(jī)體中就會(huì)誘導(dǎo)出針對(duì)不同抗原決定簇的多種抗體，如果要把這些抗體一一分開(kāi),，用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的,。1975年科勒（Kohler）和米爾斯坦（Milstein）將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合，培養(yǎng)出既能迅速生長(zhǎng)無(wú)限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,。從而獲得針對(duì)某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體,。1995年，Katherine Knight博士在美國(guó)芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞（Plasmacytoma）,，開(kāi)創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù),。與鼠單抗相比，兔單抗具有：首先,，兔抗血清通常含有高親和力抗體,，可以比鼠抗血清識(shí)別更多種類(lèi)的表位,；其次，兔單克隆抗體能夠識(shí)別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原,；第三,，由于兔脾臟較大，可以更多進(jìn)行的融合試驗(yàn),，使得高通量篩選融合成
抗體的特異性鑒定 ：
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力,。抗體的特異性高,，它的識(shí)別能力就強(qiáng),。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定,。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,，計(jì)算各自的結(jié)合率，求出各自在 IC50時(shí)的濃度,，并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,，而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),，表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0，即該血清的特異性較好,。<
單克隆抗體和多克隆抗體有什么區(qū)別?
抗原上那部分可以引起機(jī)體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),，叫做抗原決定簇。一個(gè)抗原上可以有好幾個(gè)不同的抗原決定簇,，因而使機(jī)體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,，zui終產(chǎn)生出抗體是漿細(xì)胞。只針對(duì)一個(gè)抗原決定簇起作用的漿細(xì)胞群就是一個(gè)純系,，純系的英文為Clone,，音譯就是克隆。
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體,。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,，就象導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面,，即使是同一個(gè)抗原決定簇,，在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來(lái)產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物,，稱(chēng)為多克隆抗體,。<