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Anti-ABCG1/FITC

熒光素標記兔抗人,、大,、小鼠ABCG1抗體IgG

標記抗體（一抗）

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蛋白質(zhì)與多肽的：
多肽：通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,，它們的分子量低于10,，000Da（Dalton，道爾頓）,，能透過半透膜,，不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀。也有文獻把由2~10個氨基酸組成的肽稱為寡肽（小分子肽）,；10~50個氨基酸組成的肽稱為多肽,；由50個以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì)。
蛋白質(zhì)：生物體中廣泛存在的一類生物大分子,，由核酸編碼的α氨基酸之間通過α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈,，經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的,、有活性的大分子。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈,，再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物,。
就是：都是由20種基本氨基酸通過肽鍵連接而成的,。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別：
　　蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡寫為：C,、H、O,、N等元素→氨基酸→多肽（肽鏈）→蛋白質(zhì),。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個層次,，區(qū)別如下：
　　①多肽和蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異,。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級結(jié)構(gòu)形式,，而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的,，一個蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成（如高等動物的細胞色素c是由104個氨基酸殘基的一條肽鏈組成）,，也可由多條肽鏈通過一定的化學鍵（肯定不是肽鍵，如二硫鍵,、氫鍵等）連接而成（如胰島素由2條肽鏈組成,、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成,、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等）,。
　　②多肽與蛋白質(zhì)的功能有差異,。多肽往往是無生物活性，而蛋白質(zhì)是具有生物活性的,。多肽一般無活性（如蛋白質(zhì)在胃,、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽），少數(shù)有活性（如抗利尿激素就是多肽類激素）,，與蛋白質(zhì)相比,，多肽的分子量較小，沒有空間結(jié)構(gòu),，一般無活性,；蛋白質(zhì)的分子量較大，有空間結(jié)構(gòu),，有活性（變性后活性下降或消失,，活性消失叫做失活）
　　因此，一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實際上不能稱為蛋白質(zhì),。
多肽合成：
是一個重復添加氨基酸的過程,，固相合成順序一般從C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成,。過去的多肽合成是在溶液中進行的稱為液相合成法。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來,，經(jīng)過不斷的改進和完善,，到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個常用技術(shù)，表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點,，從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度,。多肽合成總的來說分成兩種：固相合成和液相多肽合成。
抗體規(guī)律：
　?。?）初次反應產(chǎn)生抗體：當抗原*次進入機體時,，需經(jīng)一定的潛伏期才能產(chǎn)生抗體，且抗體產(chǎn)生的量也不多,，在體內(nèi)維持的時間也較短,。
　　（2）再次反應產(chǎn)生抗體：當相同抗原第二次進入機體后,，開始時,，由于原有抗體中的一部分與再次進入的抗原結(jié)合，可使原有抗體量略為降低,。隨后,，抗體效價迅速大量增加，可比初次反應產(chǎn)生的多幾倍到幾十倍,，在體內(nèi)留存的時間亦較長,。
　　（3）回憶反應產(chǎn)生抗體：由抗原刺激機體產(chǎn)生的抗體,，經(jīng)過一定時間后可逐漸消失,。此時若再次接觸抗原，可使已消失的抗體快速上升,。如再次刺激機體的抗原與初次相同,，則稱為特異性回憶反應；若與初次反應不同,，則稱為非特異性回憶反應,。非特異性回憶反應引起的抗體的上升是暫時性的，短時間內(nèi)即很快下降,。
按理化性質(zhì)和生物學功能分類：
　　按理化性質(zhì)和生物學功能,，可將其分為IgM、IgG,、IgA,、IgE、IgD五類,。
　　IgM抗體是免疫應答中首先分泌的抗體,。它們在與抗原結(jié)合后啟動補體的級聯(lián)反應,。它們還把入侵者相互連接起來，聚成一堆便于巨噬細胞的吞噬,；
　 IgG抗體激活補體,，中和多種毒素。IgG持續(xù)的時間長,，是*能在母親妊娠期穿過胎盤保護胎兒的抗體,。他們還從乳腺分泌進入初乳，使新生兒得到保護,；
　　IgA抗體進入身體的黏膜表面,，包括呼吸、消化,、生殖等管道的黏膜,，中和感染因子。還可以通過母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中,，是在母乳中含量zui多,，zui為重要的一類抗體；
　　IgE抗體的尾部與嗜堿細胞,、肥大細胞的細胞膜結(jié)合,。當抗體與抗原結(jié)合后，嗜堿細胞與肥大細胞釋放組織胺一類物質(zhì)促進炎癥的發(fā)展,。這也是引發(fā)速發(fā)型過敏反應的抗體,；
　　IgD抗體的作用還不太清楚。它們主要出現(xiàn)在成熟的B淋巴細胞表面上,，可能與B細胞的分化有關(guān),。
（IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發(fā)現(xiàn)，分子量為175kD,，主要由扁桃體,、脾等處漿細胞產(chǎn)生，人血清中IgD濃度為3～40μg/ml,不到血清總Ig的1%,，在個體發(fā)育中合成較晚。IgD鉸鏈區(qū)很長,，且對蛋白酶水解敏感,，因此IgD半衰期很短，僅2.8天,。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚,。在B細胞分化到成熟B細胞階段，除了表達SmIgD,，抗原刺激后表現(xiàn)為免疫耐受,。成熟B細胞活化后或者活化后或者變成記憶B細胞時,，SmIgD逐漸消失。）
抗體結(jié)構(gòu)：
　　抗體是具有4條多肽鏈的對稱結(jié)構(gòu),，其中2條較長,、相對分子量較大的相同的重鏈（H鏈）；2條較短,、相對分子量較小的相同的輕鏈（L鏈）,。鏈間由二硫鍵和非共價鍵聯(lián)結(jié)形成一個由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子。輕鏈有κ和λ兩種,，重鏈有μ,、δ、γ,、ε和α五種,。 整個抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在給定的物種中,，不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列,。可變區(qū)位于"Y"的兩臂末端,。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強烈,，這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū)。高變區(qū)位于分子表面,，zui多由17個氨基酸殘基構(gòu)成,，少則只有2 ～ 3個。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性,。一個抗體分子上的兩個抗原結(jié)合部位是相同的,，位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段（antigen-binding fragment, Fab）。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段（crystalline fragment,FC）,，糖結(jié)合在FC 上,。
生物活性：
　　（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷,。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,，直接發(fā)揮中和病毒的作用,。 　
　（2）激活補體：IgM,、IgG1,、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體,。
　?。?）結(jié)合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細胞,，產(chǎn)生不同的疚,，參與免疫應答。
　?。?）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中,，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜,，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素,。
　　（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì),，也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應答的性能,。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性,。
　?。?）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞,。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀,。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,，再經(jīng)透析法將其純化,。
　　（7）通過與細胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應 　?、僬{(diào)理作用 　　IgG,、IgM的Fc段與吞噬細胞表面的FcγR、FcμR結(jié)合,，增強其吞噬能力,，通常將抗體促進吞噬細胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 （opsonization）。 　?、诎l(fā)揮抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用,。