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C.L.E.D培養(yǎng)基添加劑

食品衛(wèi)生檢驗(yàn)培養(yǎng)基

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每支加入100mlC.L.E.D培養(yǎng)基中

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相關(guān)知識>>>>>

多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟：
　　1,、制備抗原。 　
　2,、選擇實(shí)驗(yàn)動物,。
　　3、動物免疫,。 　
　4,、試取血進(jìn)行測試，看看是否成功免疫,。
　　5,、如果成功免疫，殺死實(shí)驗(yàn)動物,，采集全部血清,。
　　6、純化出抗體,。 　
　7,、鑒定抗體。包括純度以及特異性,。
　　按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能分類：
　　按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能,，可將其分為IgM、IgG,、IgA,、IgE、IgD五類,。
　　IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的抗體,。它們在與抗原結(jié)合后啟動補(bǔ)體的級聯(lián)反應(yīng)。它們還把入侵者相互連接起來,，聚成一堆便于巨噬細(xì)胞的吞噬,；
　 IgG抗體激活補(bǔ)體，中和多種毒素,。IgG持續(xù)的時間長,，是*能在母親妊娠期穿過胎盤保護(hù)胎兒的抗體。他們還從乳腺分泌進(jìn)入初乳,，使新生兒得到保護(hù),；
　　IgA抗體進(jìn)入身體的黏膜表面，包括呼吸,、消化,、生殖等管道的黏膜,，中和感染因子。還可以通過母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中,，是在母乳中含量zui多,，zui為重要的一類抗體；
　　IgE抗體的尾部與嗜堿細(xì)胞,、肥大細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)合,。當(dāng)抗體與抗原結(jié)合后，嗜堿細(xì)胞與肥大細(xì)胞釋放組織胺一類物質(zhì)促進(jìn)炎癥的發(fā)展,。這也是引發(fā)速發(fā)型過敏反應(yīng)的抗體,；
　　IgD抗體的作用還不太清楚。它們主要出現(xiàn)在成熟的B淋巴細(xì)胞表面上,，可能與B細(xì)胞的分化有關(guān),。
（IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發(fā)現(xiàn)，分子量為175kD,，主要由扁桃體,、脾等處漿細(xì)胞產(chǎn)生，人血清中IgD濃度為3～40μg/ml,不到血清總Ig的1%,，在個體發(fā)育中合成較晚,。IgD鉸鏈區(qū)很長，且對蛋白酶水解敏感,，因此IgD半衰期很短,，僅2.8天。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚,。在B細(xì)胞分化到成熟B細(xì)胞階段,，除了表達(dá)SmIgD，抗原刺激后表現(xiàn)為免疫耐受,。成熟B細(xì)胞活化后或者活化后或者變成記憶B細(xì)胞時,，SmIgD逐漸消失。）
單克隆抗體：
　?。╩onoclonal antibody，McAb）克隆選擇學(xué)說：淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體,，一種細(xì)胞帶一種受體,，進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個別淋巴細(xì)胞，使之活化,，增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群,，分泌同樣的抗體。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi),，在機(jī)體中就會誘導(dǎo)出針對不同抗原決定簇的多種抗體,，如果要把這些抗體一一分開,，用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的。1975年科勒（Kohler）和米爾斯坦（Milstein）將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,，培養(yǎng)出既能迅速生長無限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,。從而獲得針對某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體。1995年,，Katherine Knight博士在美國芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞（Plasmacytoma）,，開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù)。與鼠單抗相比,，兔單抗具有：首先,，兔抗血清通常含有高親和力抗體，可以比鼠抗血清識別更多種類的表位,；其次,，兔單克隆抗體能夠識別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原；第三,，由于兔脾臟較大,，可以更多進(jìn)行的融合試驗(yàn)，使得高通量篩選融合成為可能,。
抗體的親和力 ：
是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度,。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的,。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,、范德華力和空間斥力,。親和力常以親和常數(shù)K表示，K的單位是L/mol,，通常K的范圍在 108 ～1010 /mol,，也有多達(dá) 1014 /mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選,，確定抗體的用途，驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義,。
zui初有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分,，故曾把抗體統(tǒng)稱為丙種（γ）球蛋白。后來發(fā)現(xiàn),，抗體并不都在γ區(qū),；并且位于γ區(qū)的球蛋白，也不一定都具有抗體活性,。
　　 1964年,，世界衛(wèi)生組織舉行專門會議,，將具有抗體活性以及與抗體相關(guān)的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白（Ig），如骨髓瘤蛋白,，巨球蛋白血癥,、冷球蛋白血癥等患者血清中存在的異常免疫球蛋白以及正常人天然存在的免疫球蛋白亞單位等。因而免疫球蛋白是結(jié)構(gòu)化學(xué)的概念,，而抗體是生物學(xué)功能的概念,。可以說,，幾乎所有抗體都是免疫球蛋白（極少數(shù)抗體為RNA）,，但并非所有免疫球蛋白都是抗體。