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標(biāo)準(zhǔn)II號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂

食品衛(wèi)生檢驗(yàn)培養(yǎng)基

250g

細(xì)菌計(jì)數(shù),、不含糖,，可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用（MERCK方法）

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蛋白質(zhì)與多肽的：
多肽：通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽，它們的分子量低于10,，000Da（Dalton,，道爾頓），能透過(guò)半透膜,，不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀,。也有文獻(xiàn)把由2~10個(gè)氨基酸組成的肽稱為寡肽（小分子肽）；10~50個(gè)氨基酸組成的肽稱為多肽,；由50個(gè)以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì),。
蛋白質(zhì)：生物體中廣泛存在的一類生物大分子，由核酸編碼的α氨基酸之間通過(guò)α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈,，經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的,、有活性的大分子。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈,，再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物,。
就是：都是由20種基本氨基酸通過(guò)肽鍵連接而成的。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別：
　　蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡(jiǎn)寫為：C,、H,、O、N等元素→氨基酸→多肽（肽鏈）→蛋白質(zhì),。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個(gè)層次,，區(qū)別如下：
　　①多肽和蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異,。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級(jí)結(jié)構(gòu)形式,，而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的,，一個(gè)蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成（如高等動(dòng)物的細(xì)胞色素c是由104個(gè)氨基酸殘基的一條肽鏈組成）,，也可由多條肽鏈通過(guò)一定的化學(xué)鍵（肯定不是肽鍵，如二硫鍵,、氫鍵等）連接而成（如胰島素由2條肽鏈組成,、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成,、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等）,。
　　②多肽與蛋白質(zhì)的功能有差異,。多肽往往是無(wú)生物活性,，而蛋白質(zhì)是具有生物活性的,。多肽一般無(wú)活性（如蛋白質(zhì)在胃、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽）,，少數(shù)有活性（如抗利尿激素就是多肽類激素）,，與蛋白質(zhì)相比，多肽的分子量較小,，沒(méi)有空間結(jié)構(gòu),，一般無(wú)活性；蛋白質(zhì)的分子量較大,，有空間結(jié)構(gòu),，有活性（變性后活性下降或消失,，活性消失叫做失活）
　　因此,，一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實(shí)際上不能稱為蛋白質(zhì)。
多肽合成：
是一個(gè)重復(fù)添加氨基酸的過(guò)程,，固相合成順序一般從C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成,。過(guò)去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來(lái),，經(jīng)過(guò)不斷的改進(jìn)和完善,，到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個(gè)常用技術(shù)，表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點(diǎn),，從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度,。多肽合成總的來(lái)說(shuō)分成兩種：固相合成和液相多肽合成。
抗體的效價(jià)鑒定：
不管是用于診斷還是用于治療,，制備抗體的目的都是要求較高效價(jià),。不同的抗原制備的抗體，要求的效價(jià)不一,。鑒定效價(jià)的方法很多,，包括有試管凝集反應(yīng)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等,。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法，以資比較,。如制備抗抗體的效價(jià),，一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
生物活性：
　?。?）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,，通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,，抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合,，直接發(fā)揮中和病毒的作用,。 　
　（2）激活補(bǔ)體：IgM,、IgG1,、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體，凝聚的IgA,、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體,。
　　（3）結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白,，可結(jié)合不同種的細(xì)胞,，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答,。
　?。?）可通過(guò)胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫,。免疫球蛋白A（IgA）可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
　?。?）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì),，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,，各具有不同的抗原性,。
　　（6）抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱,，60～70℃即被破壞,。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用,?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,，再經(jīng)透析法將其純化。
　?。?）通過(guò)與細(xì)胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng) 　?、僬{(diào)理作用 　　IgG、IgM的Fc段與吞噬細(xì)胞表面的FcγR,、FcμR結(jié)合,，增強(qiáng)其吞噬能力，通常將抗體促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 （opsonization）,。 　?、诎l(fā)揮抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用,。
抗體的效價(jià)鑒定：
不管是用于診斷還是用于治療，制備抗體的目的都是要求較高效價(jià),。不同的抗原制備的抗體,，要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,，包括有試管凝集反應(yīng),、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等,。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,，以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),，一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定,。
抗體的特異性鑒定 ：
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力?？贵w的特異性高,，它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示,。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,，計(jì)算各自的結(jié)合率,，求出各自在 IC50時(shí)的濃度，并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率,。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,，而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí)，表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,，即該血清的特異性較好,。