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更新時間:2018-09-12 09:53:00瀏覽次數(shù):867
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瓊脂培養(yǎng)基F
歐洲藥典培養(yǎng)基(EP標(biāo)準(zhǔn))
250g
用于腸道菌計數(shù)和腸桿菌科鑒別
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按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能分類:
按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能,,可將其分為IgM、IgG,、IgA,、IgE、IgD五類,。
IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的抗體,。它們在與抗原結(jié)合后啟動補(bǔ)體的級聯(lián)反應(yīng)。它們還把入侵者相互連接起來,,聚成一堆便于巨噬細(xì)胞的吞噬,;
IgG抗體激活補(bǔ)體,中和多種毒素,。IgG持續(xù)的時間長,,是*能在母親妊娠期穿過胎盤保護(hù)胎兒的抗體。他們還從乳腺分泌進(jìn)入初乳,,使新生兒得到保護(hù),;
IgA抗體進(jìn)入身體的黏膜表面,包括呼吸,、消化,、生殖等管道的黏膜,中和感染因子,。還可以通過母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中,,是在母乳中含量zui多,zui為重要的一類抗體,;
IgE抗體的尾部與嗜堿細(xì)胞,、肥大細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)合。當(dāng)抗體與抗原結(jié)合后,,嗜堿細(xì)胞與肥大細(xì)胞釋放組織胺一類物質(zhì)促進(jìn)炎癥的發(fā)展,。這也是引發(fā)速發(fā)型過敏反應(yīng)的抗體,;
IgD抗體的作用還不太清楚。它們主要出現(xiàn)在成熟的B淋巴細(xì)胞表面上,,可能與B細(xì)胞的分化有關(guān),。
(IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發(fā)現(xiàn),,分子量為175kD,,主要由扁桃體、脾等處漿細(xì)胞產(chǎn)生,,人血清中IgD濃度為3~40μg/ml,不到血清總Ig的1%,,在個體發(fā)育中合成較晚。IgD鉸鏈區(qū)很長,,且對蛋白酶水解敏感,,因此IgD半衰期很短,僅2.8天,。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚,。在B細(xì)胞分化到成熟B細(xì)胞階段,除了表達(dá)SmIgD,,抗原刺激后表現(xiàn)為免疫耐受,。成熟B細(xì)胞活化后或者活化后或者變成記憶B細(xì)胞時,SmIgD逐漸消失,。)
按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能分類:
按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能,,可將其分為IgM、IgG,、IgA,、IgE、IgD五類,。
IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的抗體,。它們在與抗原結(jié)合后啟動補(bǔ)體的級聯(lián)反應(yīng)。它們還把入侵者相互連接起來,,聚成一堆便于巨噬細(xì)胞的吞噬,;
IgG抗體激活補(bǔ)體,中和多種毒素,。IgG持續(xù)的時間長,,是*能在母親妊娠期穿過胎盤保護(hù)胎兒的抗體。他們還從乳腺分泌進(jìn)入初乳,,使新生兒得到保護(hù),;
IgA抗體進(jìn)入身體的黏膜表面,包括呼吸,、消化,、生殖等管道的黏膜,,中和感染因子。還可以通過母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中,,是在母乳中含量zui多,,zui為重要的一類抗體;
IgE抗體的尾部與嗜堿細(xì)胞,、肥大細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)合,。當(dāng)抗體與抗原結(jié)合后,嗜堿細(xì)胞與肥大細(xì)胞釋放組織胺一類物質(zhì)促進(jìn)炎癥的發(fā)展,。這也是引發(fā)速發(fā)型過敏反應(yīng)的抗體,;
IgD抗體的作用還不太清楚。它們主要出現(xiàn)在成熟的B淋巴細(xì)胞表面上,,可能與B細(xì)胞的分化有關(guān),。
(IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發(fā)現(xiàn),分子量為175kD,,主要由扁桃體,、脾等處漿細(xì)胞產(chǎn)生,人血清中IgD濃度為3~40μg/ml,不到血清總Ig的1%,,在個體發(fā)育中合成較晚,。IgD鉸鏈區(qū)很長,且對蛋白酶水解敏感,,因此IgD半衰期很短,,僅2.8天。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚,。在B細(xì)胞分化到成熟B細(xì)胞階段,,除了表達(dá)SmIgD,抗原刺激后表現(xiàn)為免疫耐受,。成熟B細(xì)胞活化后或者活化后或者變成記憶B細(xì)胞時,,SmIgD逐漸消失。)
蛋白質(zhì)與多肽的:
多肽:通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,,它們的分子量低于10,,000Da(Dalton,道爾頓),,能透過半透膜,,不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀。也有文獻(xiàn)把由2~10個氨基酸組成的肽稱為寡肽(小分子肽),;10~50個氨基酸組成的肽稱為多肽,;由50個以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì)。
蛋白質(zhì):生物體中廣泛存在的一類生物大分子,,由核酸編碼的α氨基酸之間通過α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈,,經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的,、有活性的大分子。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈,,再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物,。
就是:都是由20種基本氨基酸通過肽鍵連接而成的。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別:
蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡寫為:C,、H,、O、N等元素→氨基酸→多肽(肽鏈)→蛋白質(zhì),。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個層次,,區(qū)別如下:
①多肽和蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異,。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級結(jié)構(gòu)形式,而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu),。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的,,一個蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成(如高等動物的細(xì)胞色素c是由104個氨基酸殘基的一條肽鏈組成),也可由多條肽鏈通過一定的化學(xué)鍵(肯定不是肽鍵,,如二硫鍵,、氫鍵等)連接而成(如胰島素由2條肽鏈組成、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成,、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成,、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等)。
?、诙嚯呐c蛋白質(zhì)的功能有差異,。多肽往往是無生物活性,而蛋白質(zhì)是具有生物活性的,。多肽一般無活性(如蛋白質(zhì)在胃,、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽),少數(shù)有活性(如抗利尿激素就是多肽類激素),,與蛋白質(zhì)相比,,多肽的分子量較小,沒有空間結(jié)構(gòu),,一般無活性,;蛋白質(zhì)的分子量較大,有空間結(jié)構(gòu),,有活性(變性后活性下降或消失,,活性消失叫做失活)
因此,一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實際上不能稱為蛋白質(zhì),。
多肽合成:
是一個重復(fù)添加氨基酸的過程,,固相合成順序一般從C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成,。過去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來,,經(jīng)過不斷的改進(jìn)和完善,,到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個常用技術(shù),表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點(diǎn),,從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度,。多肽合成總的來說分成兩種:固相合成和液相多肽合成。
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟:
1,、制備抗原,。
2、選擇實驗動物,。
3,、動物免疫。
4,、試取血進(jìn)行測試,,看看是否成功免疫。
5,、如果成功免疫,,殺死實驗動物,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。包括純度以及特異性。
單克隆抗體:
?。╩onoclonal antibody,,McAb)克隆選擇學(xué)說:淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體,一種細(xì)胞帶一種受體,,進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個別淋巴細(xì)胞,,使之活化,增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群,,分泌同樣的抗體,。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi),在機(jī)體中就會誘導(dǎo)出針對不同抗原決定簇的多種抗體,,如果要把這些抗體一一分開,,用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的。1975年科勒(Kohler)和米爾斯坦(Milstein)將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,培養(yǎng)出既能迅速生長無限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,。從而獲得針對某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體,。1995年,Katherine Knight博士在美國芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞(Plasmacytoma),,開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù),。與鼠單抗相比,兔單抗具有:首先,,兔抗血清通常含有高親和力抗體,,可以比鼠抗血清識別更多種類的表位;其次,,兔單克隆抗體能夠識別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原,;第三,由于兔脾臟較大,,可以更多進(jìn)行的融合試驗,,使得高通量篩選融合成為可能。