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更新時間:2018-09-12 09:53:01瀏覽次數(shù):642
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大豆-干酪素消化物培養(yǎng)基
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多克隆抗體:
定義1:由多個B細胞克隆所產(chǎn)生的抗體,,可與不同抗原表位結(jié)合且免疫球蛋白類別各異,。
所屬學科:免疫學(一級學科),;免疫系統(tǒng)(二級學科);免疫分子(三級學科)
定義2:對特定抗原所產(chǎn)生的一組免疫球蛋白混合物,,每種免疫球蛋白能識別抗原分子上的一個表位,。
所屬學科:生物化學與分子生物學(一級學科),;總論(二級學科)
定義3:多種抗原表位刺激機體免疫系統(tǒng)后,,機體產(chǎn)生的針對不同抗原表位的混合抗體。
所屬學科:細胞生物學(一級學科),;細胞免疫(二級學科)
zui初有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分,,故曾把抗體統(tǒng)稱為丙種(γ)球蛋白。后來發(fā)現(xiàn),,抗體并不都在γ區(qū),;并且位于γ區(qū)的球蛋白,也不一定都具有抗體活性,。
1964年,,世界衛(wèi)生組織舉行專門會議,將具有抗體活性以及與抗體相關(guān)的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白(Ig),,如骨髓瘤蛋白,,巨球蛋白血癥、冷球蛋白血癥等患者血清中存在的異常免疫球蛋白以及正常人天然存在的免疫球蛋白亞單位等,。因而免疫球蛋白是結(jié)構(gòu)化學的概念,,而抗體是生物學功能的概念??梢哉f,,幾乎所有抗體都是免疫球蛋白(極少數(shù)抗體為RNA),但并非所有免疫球蛋白都是抗體,。
抗體的特異性鑒定 :
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力,。抗體的特異性高,,它的識別能力就強,。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定,。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,,計算各自的結(jié)合率,求出各自在 IC50時的濃度,,并按下列公式計算交叉反應(yīng)率,。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,,表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,,即該血清的特異性較好,。
抗體(antibody)
指機體的免疫系統(tǒng)在抗原刺激下,由B淋巴細胞或記憶細胞增殖分化成的漿細胞所產(chǎn)生的,、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白,。主要分布在血清中,也分布于組織液及外分泌液中,。
一抗體和二抗體:
一抗是針對抗原的抗體,,二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當抗原刺激機體產(chǎn)生抗體,。
*抗體就是我們平時所說的抗體,,它能和抗原特異性結(jié)合。
第二抗體是能和抗體結(jié)合,,即抗體的抗體,,其主要作用是檢測抗體的存在。
蛋白質(zhì)與多肽的:
多肽:通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽,,它們的分子量低于10,,000Da(Dalton,道爾頓),,能透過半透膜,,不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀。也有文獻把由2~10個氨基酸組成的肽稱為寡肽(小分子肽),;10~50個氨基酸組成的肽稱為多肽,;由50個以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì)。
蛋白質(zhì):生物體中廣泛存在的一類生物大分子,,由核酸編碼的α氨基酸之間通過α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈,,經(jīng)翻譯后加工而生成的具有特定立體結(jié)構(gòu)的、有活性的大分子,。是α—氨基酸按一定順序結(jié)合形成一條多肽鏈,,再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結(jié)合合而成的高分子化合物。
就是:都是由20種基本氨基酸通過肽鍵連接而成的,。
多肽與蛋白質(zhì)的區(qū)別:
蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次可簡寫為:C,、H、O,、N等元素→氨基酸→多肽(肽鏈)→蛋白質(zhì),。多肽與蛋白質(zhì)是不同的兩個層次,區(qū)別如下:
?、俣嚯暮偷鞍踪|(zhì)的結(jié)構(gòu)有差異,。多肽僅僅是蛋白質(zhì)的初級結(jié)構(gòu)形式,而蛋白質(zhì)具有一定的空間結(jié)構(gòu),。蛋白質(zhì)是由多肽和其他物質(zhì)結(jié)合而成的,,一個蛋白質(zhì)分子可由一條肽鏈組成(如高等動物的細胞色素c是由104個氨基酸殘基的一條肽鏈組成),,也可由多條肽鏈通過一定的化學鍵(肯定不是肽鍵,如二硫鍵,、氫鍵等)連接而成(如胰島素由2條肽鏈組成,、胰凝乳蛋白酶是由3條肽鏈組成、血紅蛋白分子由4條肽鏈組成,、免疫球蛋白分子由4條肽鏈組成等),。
②多肽與蛋白質(zhì)的功能有差異,。多肽往往是無生物活性,,而蛋白質(zhì)是具有生物活性的。多肽一般無活性(如蛋白質(zhì)在胃,、小腸中經(jīng)消化產(chǎn)生的多肽),少數(shù)有活性(如抗利尿激素就是多肽類激素),,與蛋白質(zhì)相比,,多肽的分子量較小,沒有空間結(jié)構(gòu),,一般無活性,;蛋白質(zhì)的分子量較大,有空間結(jié)構(gòu),,有活性(變性后活性下降或消失,,活性消失叫做失活)
因此,一條剛從核糖體中合成的多肽鏈實際上不能稱為蛋白質(zhì),。
多肽合成:
是一個重復(fù)添加氨基酸的過程,,固相合成順序一般從C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。過去的多肽合成是在溶液中進行的稱為液相合成法,。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來,,經(jīng)過不斷的改進和完善,到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個常用技術(shù),,表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點,,從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。多肽合成總的來說分成兩種:固相合成和液相多肽合成,。